西洋参(
UV-9000紫外-可见分光光度计(上海元析仪器有限公司),JA303H分析天平(千分之一,上海天平仪器厂),FA1104B 分析天平(万分之一,上海菁海仪器有限公司),HH-1电热恒温水浴锅(天津市泰斯特仪器有限公司),SHB-B95 型循环水式多用真空泵(郑州长城科工贸有限公司),HH-601超级恒温水浴锅(江苏金坛市亿通电子有限公司),滴丸装置(实验室自制)。
聚乙二醇4000(PEG4000,天津市大茂化学试剂厂,批号:20110816),聚乙二醇6000(PEG6000,天津市大茂化学试剂厂,批号:20110923),液体石蜡(莱阳市康德化工有限公司,批号:20070213),石油醚(天津市富宇精细化工有限公司,批号:20150923),色谱甲醇(山东禹王实业有限公司,批号:20150402),色谱乙腈(山东禹王实业有限公司,批号:20140317),所用试剂均为分析纯;水为蒸馏水;西洋参(山东省威海市威海金颐阳药业有限公司提供,产地:山东省威海市文登经济开发区,经山东中医药大学韩春超副教授鉴定为五加科人参属多年生草木植物西洋参的根茎),西洋参提取液(山东中医药大学药剂学实验室自制,按原料药西洋参计,为0.8 g·mL-1)。
采用15倍量水提取3次,每次1.5 h,保持微沸,提取液浓缩至0.8 g·mL-1 (原料药-西洋参),加入1倍量无水乙醇醇沉,滤液加入3倍量石油醚萃取5次,浓缩、干燥、粉碎,过200目筛(筛孔内径:75 μm),粉末置于放有变色硅胶的玻璃干燥器中,备用。
根据单因素工艺考察得到西洋参滴丸最佳制备工艺为:药物(西洋参提取液)与基质的配比1:5,滴制温度80 ℃,冷凝温度5 ℃。故以药物与基质的配比(以下均称药基比),滴制温度、冷凝液温度为变量因素,根据响应面分析法中Box-Behnken中心组合实验设计方案,利用统计软件Design-Expert(version8.0.5)对实验数据进行回归分析,实验因子和水平见
2.3.1 滴丸基质的选择 聚乙二醇是滴丸制备中应用较广的一类基质,无生理作用而易溶于体液,既能释放水溶性药物,又能释放脂溶性药物[9]。而相对于其他水溶性基质而言,聚乙二醇价格低廉,具有良好的水溶性,并与许多有机物组分有良好的相容性。而且实验发现西洋参提取液均匀分散于聚乙二醇,故优选聚乙二醇4000和(或)聚乙二醇6000作为西洋参滴丸的基质。
2.3.2 滴丸冷凝剂的选择 对于水溶性基质可用液体石蜡、植物油、甲基硅油、煤油等作为冷凝剂,通过滴丸沉降速度的测定,液体石蜡39~47滴·min-1,且滴丸圆整度和成型率较高,不会出现粘结成块的现象,符合本实验的实验要求,优选液体石蜡作为冷凝剂。
2.3.3 滴丸工艺的验证 西洋参滴丸的最佳制备工艺如下:聚乙二醇4000和聚乙二醇6000(1:1)为基质,药物与基质的比例为1:6,液体石蜡为冷凝剂,滴制温度为90 ℃,冷凝温度为2 ℃,制备滴丸,研碎,称定质量,溶于甲醇,高效液相色谱(HPLC)法测定滴丸中人参皂苷Re的量。
通过“2.3.1”项初步优选结果,进一步确定聚乙二醇( PEG4000-PEG6000)的分配比例。以滴丸成型率为指标,按照单因素实验的结果,对滴丸基质比例进行优化,结果见
在单因素实验的基础上,根据响应面分析法中Box-Behnken 中心组合试验设计方案,以滴丸成型率(成型的滴丸/滴制滴丸总数)作为考察指标,对药物与基质的配比、滴制温度、冷凝液温度进行优化,其实验方案与结果见
由
2.5.1 响应曲面的分析 在本实验考察中,各因素变量对滴丸成型率的影响、二维等高线和三维响应曲面图见
优化后滴丸的成型工艺为:基质的比例为PEG4000-PEG6000 1:1;药物与基质的比例为1:6,滴制温度为90 ℃,冷凝温度为2 ℃。在此条件下,该模型滴丸成型率预测最大值为95.99%。为了验证滴丸成型工艺的精准性,对该模型进行了验证实验。按照滴丸最佳成型工艺进行3次重复实验,滴丸成型率平均值为93.67%,其实验值与预测值相差2.32%,可表明此模型可行有效。通过高效液相得出人参皂苷Re的标准曲线为:
本研究在单因素实验的基础上,采用响应面分析法中Box-Behnken 中心组合实验设计方案,以滴丸的成型率作为考察指标,对药物与基质的配比、滴制温度、冷凝液温度进行优化,最终优化后滴丸的成型工艺为如下,基质比例为PEG4000-PEG6000 1:1;药物与基质的比例为0.17(1:6),滴制温度为90 ℃,冷凝温度为2 ℃。在此条件下,该模型滴丸成型率预测最大值为95.99%。通过验证实验,发现该模型确实有效,为西洋参滴丸的制备提供科学参考。
The authors have declared that no competing interests exist.