目的 研究液固压缩技术在斑蝥素固体制剂中的应用。方法 载体材料和吸附材料的质量比为20∶1,药液比为1∶4,液体赋形剂为丙二醇,载体材料为微晶纤维素,吸附材料为微粉硅胶,制备并考察了斑蝥素液固压缩片的质量,并与斑蝥素原料药及其普通片的溶出度进行了比较。结果 斑蝥素液固压缩片质量符合《中华人民共和国药典》2010年版要求,在120 min时溶出度近100%。结论 难溶性药物斑蝥素可以应用液固压缩技术制成固体制剂,且较普通片剂质量明显提高。
液固压缩技术(也称“溶液粉末化技术”)是一种适用于难溶性药物的新技术,是将难溶于水的药物溶解或分散在非挥发性液体溶剂中,再与载体材料和涂层材料混合,成为不包含挥发性溶剂的、流动性和可压性好的固体粉末[1]。斑蝥为芫青科昆虫南方大斑蝥(
斑蝥素对照品(中国食品药品检定研究院,含量≥98%,批号:110901);斑蝥干浸膏粉(自制,其主要活性成分以斑蝥素计不少于85%);丙二醇(分析纯,天津市广成化学试剂有限公司);乙腈(色谱纯,美国DNK公司);甲醇(色谱纯,美国DNK公司);微晶纤维素(安徽山河药用辅料有限公司) ;微粉硅胶(安徽山河药用辅料有限公司,药用级);羧甲基淀粉钠(天津市科密欧化学试剂开发中心)。
RC-6溶出度测试仪(天津市国铭医药设备有限公司);CPA225D电子天平(北京赛多利斯仪器系统有限公司,感量:0.01 mg);ZP198-17旋转式压片机(上海天峰制药设备有限公司);安捷伦1260高效液相色谱仪(G1311C泵,二极管阵列检测器,G2170BA色谱工作站,美国安捷伦公司);ZB-2智能崩解仪(天津大学精密仪器厂);CJY-2A型片剂硬度脆碎度测定仪(上海黄海药检仪器有限公司)。
2.1.1 辅料的筛选 通过预实验和文献查阅,确定处方中辅料的种类。丙二醇为液体溶剂,微晶纤维素为载体材料,微粉硅胶为吸附材料,羧甲基淀粉钠为崩解剂。
2.1.2 处方比例的筛选 根据以下公式①Ψ=液体质量/固体质量;②Lf=ΨCA+ΨCO/
结果以丙二醇为斑蝥素液固压缩片的液体辅料,药液比为1∶4,
2.1.3 液固压缩片的制备 按照上述处方量称取定量的斑蝥提取物、丙二醇、微晶纤维素、微粉硅胶、羧甲基淀粉钠。将斑蝥素加入丙二醇中,用研钵研匀,加入载体材料微晶纤维素,研匀得到湿化合物。然后加入涂层材料微粉硅胶,混合均匀。最后加入崩解剂羧甲基淀粉钠,混匀后粉末直接压片。
2.2.1 片质量差异 根据2010年版《中华人民共和国药典》附录ⅠD片剂的方法进行测定。结果斑蝥素液固压缩片的质量差异为±2.3%,符合要求[4]。
2.2.2 硬度的测定 将药片垂直固定在片剂硬度脆碎度测定仪夹头与定头之间,微调加压待药片破碎读数,每种片剂测6片,取其平均值。结果斑蝥素液固压缩片硬度为6.26 kg。
2.2.3 脆碎度的测定 取样本5片,除尘后进行称量,然后置于脆碎测定的位置,振摇过后,取出片剂,除尘称质量,计算。平均减失质量不大于1%,符合规定。
2.2.4 崩解时限的测定 采用2010年版《中华人民共和国药典》一部附录Ⅻ A崩解时限检查法中片剂方法进行测定。结果斑蝥素液固压缩片的崩解时限为97 s。
2.3.1 斑蝥素定量方法
①色谱条件与系统适用性:以十八烷基硅烷键和硅胶为填充剂;以甲醇-水(23∶77)为流动相;流速为1.0 mL·min-1;检测波长为230 nm,柱温为室温。理论板数按斑蝥素峰计算应不低于4 000[5]。
②溶液的制备:对照品溶液的制备:取斑蝥素对照品适量,精密称定,加甲醇制成每毫升含1 mg的溶液,即得。供试品溶液的制备:取样品0.5 g,精密称定,加入甲醇5 mL,超声使之溶解,滤过,滤液转移至10 mL量瓶中,流动相稀释至刻度,即得。
③线性关系实验:分别精密移取定量的斑蝥素对照品溶液2.0,6.0,6.0,8.0,10.0,12.0 μL,注入液相色谱仪,以进样量(
④精密度实验:分别精密量取同一浓度的对照品溶液10 μL,重复进样6次,测定,分析仪器精密度。结果RSD为1.37%(
⑤重复性实验:取同一批样品6份,按实验方法制备供试品溶液,各进样10 μL,测定,分析方法重复性。结果峰面积的RSD为1.19%(
⑥稳定性实验:取同一供试品溶液10 μL,分别于0,2,4,8,12,24 h进样,测定,分析供试品溶液的稳定性。结果样品在0~24 h内峰面积的RSD为1.48%(
⑦回收率实验:取已经测定含量的样品9份,每份约0.5 g,精密称定,分为3组,每组3份,按照供试品测定的斑蝥素含量,以其80%,100%,120%比例精密加入对照品贮备液,挥干甲醇后加入样品,计算加样回收率,结果见
2.3.2 普通片的制备 采用粉末直接压片法。每片含斑蝥素10 mg,每片含微晶纤维素200 mg,微粉硅胶0.5 mg,羧甲基淀粉钠10 mg。以上粉末混合均匀后,直接压片。
2.3.3 溶出度测定方法 按《中华人民共和国药典》2010年版二部溶出度测定法第一法(篮法)进行。溶出介质为水900 mL,温度控制在(37.0±0.5)℃,转速为100 r·min-1,依法操作。分别于15,30,45,60,90,120 min时取样,滤过,精密吸取续滤液20 μL注入液相色谱仪,测定溶出度[6-9]。见
由
根据药物的理化性质和膜通透性特征,生物药剂分成①高溶解性、高渗透性;②低溶解性、高渗透性;③高溶解性、低渗透性;④低溶解性、低渗透性,共四大类[7]。我国中药资源丰富,很多具有良好生物活性的有效成分存在水溶解性的问题。目前,已有多种增加难溶性药物溶解度的方法,如加助溶剂、加增溶剂、引入亲水性介质、制成固体分散体、包合物、微粒分散系统、减小粒径等,但这些方法都存在一定的局限性。斑蝥素属于低溶解性、低渗透性药物,需要采用适当的制剂技术,提高斑蝥素固体制剂的水中溶解度和溶出速率,增加膜通透性,促进口服药物的体内吸收,提高生物利用度,达到安全、有效、方便用药的目的。
随着制剂新技术的不断发展,SPIREAS等[7]首次提出液固压缩技术,主要用于提高水难溶性药物的溶解度。口服给药是中医药传统的给药方式,最容易为人们所接受。斑蝥素是一种难溶性药物,已证明具有显著的生物活性。利用液固压缩技术制备的斑蝥素口服制剂,质量符合《中华人民共和国药典》2010年版片剂项要求,片重差异、硬度和脆碎度检查结果与普通片剂无明显差异,但崩解时限仅为97 s,120 min时溶出度近100%,这可能是液固压缩片中载体材料、吸附材料和液体溶剂,使药物转变为非结晶状态,增加了药物比表面积和润湿性,使崩解时限和溶出度明显优于普通片剂。
液固压缩技术作为一种新的制剂技术,具有以下特点:①水不溶性药物也可制成优越的制剂;②可以固体制剂形式,如片剂、胶囊等存在,但药物却以溶解状态存在,水难溶性药物分散度高;③明显增加难溶性药物的释放速率,提高生物利用度;④使难溶于水的药物制成缓控释固体制剂后具有恒定的溶出速率;⑤设备、工序简单,生产成本低,便于产业化生产。我国中草药资源丰富,具有显著生物活性但溶解性差的有效成分占有一定比例,亟需对该技术进行深入研究,更好地开发和利用药材资源。所以,液固压缩技术可提高难溶性药物的生物利用度,是一种可供选择的、具有广阔发展前景的制剂技术。
The authors have declared that no competing interests exist.