甘草酸软膏对慢性湿疹小鼠模型Th1/Th2免疫机制的影响

佘姝娅, 李晋奇, 陈璐

四川省医学科学院·四川省人民医院中医科,成都 610072

SHE Shuya, LI Jinqi, CHEN Lu

Department of Traditional Chinese Medicine, Sichuan Academy of Medical Sciences & Sichuan Provincial People's Hospital,Chengdu 610072,China

通信作者李晋奇(1979-),男,山西大同人,副研究员,硕士生导师,博士,从事中药新药研发。电话:028-87393362,E-mail:lijinqi2002@126.com。

作者简介佘姝娅(1980-),女,四川绵阳人,主治医师,硕士,从事中医儿科(皮肤及肾病方向)工作。电话:028-87394912,E-mail:sharonssy554@126.com。

基金资助: 四川省科技厅支撑计划项目(2013SZ0137)

中图分类号: R285.5 文献标识码: A 文章编号: 1004-0781(2017)12-1370-04

摘要:

目的研究甘草酸软膏对慢性湿疹小鼠模型的免疫学机制的影响。方法小鼠随机分为空白对照组、模型对照组、基质对照组、醋酸地塞米松乳膏组、甘草酸软膏大、中、小剂量组,除空白对照组外其他组分别建立2,4-硝基氯苯反复刺激的慢性湿疹小鼠模型,给药14 d后检测血清白细胞介素(IL)-2、IL-4、IL-5、IL-6、IL-18和干扰素(IFN)-γ含量及对外周血中T细胞亚群进行测定。结果甘草酸软膏大、中剂量组能降血清IL-2、IL-5、IL-6、IL-18和IFN-γ的含量,与模型对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01或P<0.05);甘草酸软膏大、中剂量组能升高血清IL-4的含量,与模型对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。甘草酸软膏大、中剂量组CD4+百分比和CD4+/CD8+明显升高,而CD8+百分比明显降低,与模型对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。结论甘草酸软膏可通过调节Th1和 Th2平衡,纠正免疫功能失调而达到治疗慢性湿疹的目的。

关键词: 甘草酸软膏 ; 湿疹 ; 慢性 ; 辅助性T细胞1 ; 辅助性T细胞2 ; T细胞亚群

Abstract:

Objective To observe the immunological mechanism of glycyrrhizic acid ointment on chronic eczema mouse model. Methods Mice were randomly divided into blank control group,model control group,base material group,dexamethasone acetate cream group,glycyrrhizic acid ointment high,medium and low dose groups.Except for the blank control group,chronic eczema mouse model was established by chronic repeated 2,4-nitrochlorobenzene stimulation.The contents of IL-4,IL-18,IFN-γ in serum and the T lymphocyte subpopulation in the peripheral blood were all determined after 14 days. Results Glycyrrhizic acid ointment in high,medium groups could significantly reduce the contents of interleukin (IL)-2,IL-5,IL-6,IL-18,interferon (IFN)-γ in serum,with significant differences as compared with the model control group (P<0.01 or P<0.05).The content of IL-4 in serum was significantly increased in the glycyrrhizic acid ointment high,medium groups as compared with the model control group (P<0.01 or P<0.05).Compared with model control group,CD4+T lymphocyte percentage and CD4+/CD8+T in peripheral blood were significantly increased,and CD8+T lymphocyte percentage decreased significantly (P<0.01 or P<0.05). Conclusion Glycyrrhizic acid ointment's effect of treating chronic eczema may be related to regulating the balance of Th1 and Th2 and correcting the immune disorders.

Key words: Glycyrrhizic acid ointment ; Eczema ; chronic ; Helper T cell 1 ; Helper T cell 2 ; T lymphocyte subpopulation

湿疹是由多种因素引起的具有明显渗出倾向性的炎症性皮肤病,其病因复杂,临床表现多样,如丘疱疹、渗液、肥厚增生等。而慢性湿疹往往呈现出皮损处浸润肥厚、结痂、脱屑及苔藓样变等,严重影响患者的身心健康。现代研究表明甘草酸具有肾上腺皮质激素样及抗炎、抗变态反应等作用。临床在复方甘草酸制剂内服治疗慢性湿疹有效的基础上,笔者将甘草酸制成软膏制剂,课题组在前期的研究中发现甘草酸软膏具有抗炎、止痒及治疗慢性湿疹的药效作用^[1]。能降低皮损处皮肤一氧化氮(nitric oxide,NO)含量,并对耳廓皮肤的病理改变有一定的改善作用^[2]。本研究采用甘草酸软膏治疗慢性湿疹小鼠模型,观察其外周血清白细胞介素(interleukin,IL)2、IL-4、IL-5、IL-6、IL-18、γ干扰素(interferon-γ,IFN-γ)含量,外周血C $\begin{matrix} D_{4}^{+} \end{matrix}$ T淋巴细胞、C $\begin{matrix} D_{8}^{+} \end{matrix}$ T淋巴细胞及其比值作为主要观察指标,以进一步探讨甘草酸软膏对慢性湿疹Th1/Th2免疫机制的影响。

1 材料与方法

1.1 实验动物

选取健康昆明种白色小鼠70只,雄雌各半,体质量18~22 g,购自成都中医药大学实验动物中心。实验动物生产许可证号:SCXK(川)2008-0024;实验动物质量合格证NO:0017566,检疫后备用。实验动物均饲养于通风、恒温的实验室(国家中医药管理局认证的四川省人民医院二级中药药理实验室,编号:川药[2010]2-001)。

1.2 药物及试剂

甘草酸(成都普瑞法科技开发有限公司生产,纯度99.1%,批号:130116,有效期至2015年1月15日)。白凡士林(南昌白云药业有限公司生产,批准文号:赣食药准字F20050006,批号:20090606)。治疗药物:甘草酸软膏。白凡士林文火融化后,将甘草酸均匀倒入,同时不断地用玻棒充分搅匀。分别制成每克含10,20,40 mg甘草酸的甘草酸小、中、大剂量软膏,装瓶备用。复方醋酸地塞米松乳膏(广州白云山制药股份有限公司生产,批准文号:国药准字H44024374,批号:S1017)。丙酮(成都化学试剂厂生产,批号:040408)。2,4-硝基氯苯(DNCB,成都科龙化工试剂厂生产,批号:20091013)。小鼠 IL-2 ELISA试剂盒(批号:201302)、小鼠 IL-4 ELISA试剂盒(批号:201302)、小鼠 IL-5 ELISA试剂盒(批号:201302)、小鼠 IL-6 ELISA试剂盒(批号:201302)、小鼠IL-18 ELISA 试剂盒(批号:201302)、小鼠IFN-γELISA试剂盒(批号:201302)均为美国R&D公司产品。FITC anti-Mouse CD3e(批号:2293688),PE anti-Mouse CD4(批号:2216831)及PER CP-CY5.5 anti-Mouse CD8A(批号:00058-1631),小鼠抗TIM4多克隆抗体均为美国BD公司产品。

1.3 主要仪器

Tecan spectra Ⅲ型酶标仪(瑞士Tecan公司);FACS Calibur型流式细胞仪(美国B-D公司)。

1.4 对小鼠慢性湿疹模型血清IL-2、IL-4、IL-5、IL-6、IL-18、IFN-γ的影响

1.4.1 小鼠慢性湿疹模型造模与用药造模方法参照文献[3-4],70只小鼠,雌雄各半,随机分为空白对照组、模型对照组、基质对照组、醋酸地塞米松乳膏组、甘草酸软膏大、中、小剂量组,每组10只。每只小鼠腹部剃毛2 cm×2 cm大小,除空白对照组外,其他各组均以5%DNCB丙酮溶液25 μL外涂致敏。2周后,外涂0.1% DNCB丙酮溶液100 μL于小鼠右耳内侧处激发,每周激发1次,连续4周。在第4次激发后72 h,除空白对照组、模型对照组外,各组分别用凡士林,醋酸地塞米松乳膏,甘草酸大、中、小剂量软膏,均匀涂抹于小鼠两耳壳两面,2.5 g·kg^-1,每天1次,连续14 d。

1.4.2 小鼠血清IL-2、IL-4、IL-5、IL-6、IL-18、IFN-γ的测定给药14 d后,小鼠摘眼球取血,室温下静置30 min,再以3 000 r·min^-1(r=62 mm),离心10 min,收集血清,根据ELISA试剂盒说明书步骤,测量小鼠血清IL-2、IL-4、IL-5、IL-6、IL-18、IFN-γ的含量。

1.5 对小鼠慢性湿疹模型外周血T细胞亚群的影响

动物分组及造模方法同“1.4.1”,给药14 d后,小鼠摘眼球取血,EP试管中加入肝素抗凝。以2 500 r·min^-1(r=62 mm),离心5 min,弃上层清,收集红细胞,根据文献方法加入磷酸盐缓冲液(PBS)进行洗涤、离心后分别装入EP管中^[5]。分别加入抗小鼠CD3e,CD₄及CD₈A 单克隆抗体,充分混匀,反应45 min后上流式细胞仪检测分析。

1.6 统计学方法

数据采用SPSS17.0版统计软件处理分析,计量资料采用均数±标准差( $\begin{matrix} \bar{x} \end{matrix}$ ±s)表示,多组间均数比较采用单因素方差分析。以P<0.05为差异有统计意义。

2 结果

2.1 5组小鼠血清Th1和Th2细胞因子含量的比较

治疗14 d后,醋酸地塞米松乳膏组、甘草酸软膏大、中剂量组血清IL-4含量较模型对照组升高,差异有统计学意义(P<0.01或P<0.05);醋酸地塞米松乳膏组、甘草酸软膏大、中剂量组血清IL-2、IL-6含量较模型对照组降低,差异有统计学意义(P<0.01或P<0.05);醋酸地塞米松乳膏组和甘草酸软膏大剂量组血清IL-5、IL-18和IFN-γ含量较模型对照组降低,差异有统计学意义(P<0.01)。结果见表1,2。

表1 7组小鼠血清Th1细胞因子含量的比较
Tab.1 Comparison of the serum level of Th1 cytokines among seven groups of mice ng·L^-1,x¯±s,n=10

组别	剂量/ (mg·kg^-1)	IL-2	IL-18	IFN-γ
空白对照组	—	223.79±8.26	112.82±5.85	130.34±3.29
模型对照组	—	418.44±18.39	142.94±7.13	217.40±7.14
基质对照组	—	413.17±7.32	141.15±3.72	210.78±7.75
醋酸地塞米松
乳膏组	1.875	325.52±8.33^*1	125.31±6.04^*1	143.48±4.37^*1
甘草酸软膏
大剂量组	100	342.48±15.93^*1	126.86±3.66^*1	148.62±10.29^*1
中剂量组	50	376.14±7.34^*2	133.46±6.51	207.08±11.21
小剂量组	25	407.75±8.68	140.32±4.47	214.53±6.03
F		257.464	27.597	180.424
P		0.000	0.000	0.000

Compared with model control group,^*1P<0.01,^*2P<0.05

与模型对照组比较,^*1P<0.01,^*2P<0.05

表1 7组小鼠血清Th1细胞因子含量的比较

Tab.1 Comparison of the serum level of Th1 cytokines among seven groups of mice ng·L^-1,x¯±s,n=10

表2 7组小鼠血清Th2细胞因子含量的比较
Tab.2 Comparison of the serum level of Th2 cytokines among seven groups of mice ng·L^-1,x¯±s,n=10

组别	剂量/ (mg·kg^-1)	IL-4	IL-5	IL-6
空白对照组	—	153.49±5.33	73.65±2.60	48.25±1.58
模型对照组	—	86.01±4.47	109.00±5.12	92.26±2.41
基质对照组	—	87.75±2.76	105.79±4.71	89.70±1.57
醋酸地塞米松
乳膏组	1.875	127.21±3.60^*1	86.21±2.59^*1	57.92±2.87^*1
甘草酸软膏
大剂量组	100	116.90±4.07^*1	92.70±2.06^*1	65.26±2.88^*1
中剂量组	50	94.94±4.18^*2	102.28±5.16	85.09±3.94^*2
小剂量组	25	89.53±2.29	104.04±4.73	87.94±1.58
F		295.760	69.182	339.480
P		0.000	0.000	0.000

Compared with model control group,^*1P<0.01,^*2P<0.05

与模型对照组比较,^*1P<0.01,^*2P<0.05

表2 7组小鼠血清Th2细胞因子含量的比较

Tab.2 Comparison of the serum level of Th2 cytokines among seven groups of mice ng·L^-1,x¯±s,n=10

2.2 5组小鼠外周血T细胞亚群的比较

治疗14 d后,与模型对照组比较,醋酸地塞米松乳膏组、甘草酸软膏大、中剂量组C $\begin{matrix} D_{4}^{+} \end{matrix}$ /C $\begin{matrix} D_{8}^{+} \end{matrix}$ 明显升高,而C $\begin{matrix} D_{8}^{+} \end{matrix}$ 明显降低,两组差异均有统计学意义(P<0.01或P<0.05);而醋酸地塞米松乳膏组和甘草酸软膏大剂量组C $\begin{matrix} D_{4}^{+} \end{matrix}$ 较模型对照组明显升高,差异有统计学意义(P<0.01)。见表3。

表3 7组小鼠外周血T细胞亚群的比较
Tab.3 Comparison of T lymphocyte subpopulation in peripheral blood among seven groups of mice x¯±s,n=10

组别	剂量/ (mg·kg^-1)	CD4+		CD4+/CD8+
组别	剂量/ (mg·kg^-1)	%		CD4+/CD8+
空白对照组	—	49.65±2.07	16.71±0.79	2.98±0.17
模型对照组	—	33.51±1.76	32.16±1.02	1.04±0.04
基质对照组	—	34.81±1.42	31.81±0.72	1.10±0.07
醋酸地塞米松
乳膏组	1.875	45.45±2.08^*1	21.71±1.13^*1	2.09±0.06^*1
甘草酸软膏
大剂量组	100	44.80±1.20^*1	21.65±0.94^*1	2.07±0.11^*1
中剂量组	50	35.84±0.75	29.75±1.19^*2	1.21±0.05^*1
小剂量组	25	34.69±0.76	31.66±0.65	1.10±0.04
F		130.332	316.731	500.908
P		0.000	0.000	0.000

Compared with model control group,^*1P<0.01,^*2P<0.05

与模型对照组比较,^*1P<0.01,^*2P<0.05

表3 7组小鼠外周血T细胞亚群的比较

Tab.3 Comparison of T lymphocyte subpopulation in peripheral blood among seven groups of mice x¯±s,n=10

3 讨论

甘草在临床上的使用迄今为止已有两千多年的历史。传统医学认为甘草具有补脾益气、祛痰止咳、缓急止痛、清热解毒、调和诸药等作用。现代药理研究发现,甘草酸作为甘草最主要的活性物质,其具有抗炎、调节免疫、抗病毒、抗肿瘤、抗纤维化等作用,其中抑制免疫和抗炎症反应是最主要的作用^[6-7]。

慢性湿疹是Ⅳ型变态反应,最主要是由于Th1/Th2出现失衡而导致。Th1与细胞免疫及迟发型超敏性炎症形成有关,而Th2可辅助B细胞分化为抗体分泌细胞,与体液免疫相关。由产生IL-2、IL-18、和IFN-γ等细胞因子的C $\begin{matrix} D_{4}^{+} \end{matrix}$ T细胞(Th1)以及产生IL-4、IL-5和IL-6等细胞因子的C $\begin{matrix} D_{4}^{+} \end{matrix}$ T细胞(Th2)控制着该反应的严重程度和持续时间。作为Th1细胞分泌的IFN-γ和Th2细胞分泌的IL-4是一对相互抑制的细胞因子,两者是反映Th1、Th2细胞免疫应答参与程度的重要指标。IFN-γ可促进Th1细胞的成熟,抑制Th2细胞的增殖^[8]。而IL-4能促进Th2细胞扩增,同时抑制Th1细胞增殖并下调Th1细胞介导的免疫应答^[9-10]。二者的相互拮抗,维持了Th1/Th2 的平衡。IL-18是一种强有力的前炎症递质,可以激活Th1反应,在各种过敏性疾病、自身免疫性疾病中起免疫调节作用^[11]。另外IL-18也可诱导T淋巴细胞生成IFN-γ,从而影响慢性湿疹的发病过程。研究发现,慢性湿疹患者的皮损和血清中的IL-18水平与湿疹的严重程度,持续时间及病变范围有一定关系^[12]。IL-5、IL-6具有拮抗Th1类细胞因子的作用,可以有效抑制炎症性细胞因子和化学因子前体的产生,同时增强其自然拮抗物的表达,从而进一步抑制了免疫排斥反应的发生。

迟发性超敏反应是T淋巴细胞介导的主要细胞免疫现象。当Ⅳ型迟发型变态反应发生时,T细胞受到抗原刺激后转化为致敏的淋巴细胞,产生临床症状。C $\begin{matrix} D_{4}^{+} \end{matrix}$ 和C $\begin{matrix} D_{8}^{+} \end{matrix}$ 的比值上升,提示免疫应答的正向调节优势,而比值下降,提示免疫功能低下。慢性湿疹患者免疫异常是其发病的关键环节^[13]。有研究表明,湿疹患者外周血 C $\begin{matrix} D_{4}^{+} \end{matrix}$ 减少,而C $\begin{matrix} D_{8}^{+} \end{matrix}$ 增加,从而导致C $\begin{matrix} D_{4}^{+} \end{matrix}$ /C $\begin{matrix} D_{8}^{+} \end{matrix}$ 比值下降,说明湿疹患者外周血T细胞亚群出现紊乱^[14]。

慢性湿疹是Ⅳ型变态反应,笔者在前期研究中发现甘草酸软膏对慢性湿疹的疗效明确,为进一步探究其疗效产生的免疫学机制。笔者选择了IL-2、IL-4、IL-5、IL-6、IL-18、IFN-γ、T细胞亚群中C $\begin{matrix} D_{4}^{+} \end{matrix}$ 、C $\begin{matrix} D_{8}^{+} \end{matrix}$ 和C $\begin{matrix} D_{4}^{+} \end{matrix}$ /C $\begin{matrix} D_{8}^{+} \end{matrix}$ 来判断甘草酸软膏对机体免疫系统的影响。结果显示,甘草酸软膏大、中剂量组能降低血清IL-2和IL-6的含量;甘草酸软膏大剂量组能降低血清IL-5、IL-18和IFN-γ的含量;甘草酸软膏大、中剂量组能升高血清IL-4的含量。甘草酸软膏大、中剂量组T细胞亚群C $\begin{matrix} D_{4}^{+} \end{matrix}$ /C $\begin{matrix} D_{8}^{+} \end{matrix}$ 明显升高,而C $\begin{matrix} D_{8}^{+} \end{matrix}$ 明显降低;仅甘草酸软膏大剂量组T细胞亚群C $\begin{matrix} D_{4}^{+} \end{matrix}$ 升高。T 细胞中的 IL-5、IL-6 会表现为异常升高,而其他细胞因子经治疗后含量降低,说明Th1细胞因子在慢性湿疹中具有相对较高的含量,而Th2细胞因子是处于相关缺乏状态。而甘草酸软膏可能是通过逆转外周Th1和Th2细胞因子的表达异常,纠正了C $\begin{matrix} D_{4}^{+} \end{matrix}$ T 淋巴细胞相对减少,C $\begin{matrix} D_{8}^{+} \end{matrix}$ T淋巴细胞百分比相对增多,从而恢复Th1/Th2 平衡状态而起到治疗慢性湿疹的作用。

The authors have declared that no competing interests exist.

参考文献

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[5]	刘蓉,武志强,何敏,等.桂枝挥发油与桂皮醛对病毒性肺炎小鼠细胞因子及T细胞亚群的影响[J].中国实验方剂学杂志,2015,21(18):140-141. [本文引用:1]
[6]	王兵,王亚新,赵红燕,等.甘草的主要成分及其药理作用的研究进展[J].吉林医药学院学报,2013,34(3):215-217. 随着中药在日常保健和临床上的广泛应用,常用中药——甘草的临床应用价值也得到了进一步的肯定,实验表明其对消化系统、心血管系统、免疫系统等疾病具有良好的治疗作用.本文通过检阅甘草相关文献对其主要有效成分及药理作用作一综述. DOI:10.3969/j.issn.1673-2995.2013.03.024 URL [本文引用:1]
[7]	刘金城,潘旭旺,蒋小琴.甘草酸类固醇样药理作用及机制研究进展[J].中国药业,2010,19(9):86-87. 综述了甘草酸类固醇样药理作用及其产生机制、构效关系、不良反应等研究进展,为促进其临床应用研究提供参考. DOI:10.3969/j.issn.1006-4931.2010.09.059 URL [本文引用:1]
[8]	肖常青,邓景航,罗育武,等.白芍总苷胶囊治疗慢性湿疹的疗效观察及对外周血IFN-γ、IL-4水平的影响[J].中医药导报,2015,21(13):64-65. [本文引用:1]
[9]	李瑞奇,白明,缪君娴,等.蛤壳油糊外用对小鼠湿疹模型及豚鼠瘙痒模型的影响[J].中华中医药杂志,2013,28(6):1699-1701. [本文引用:1]
[10]	苗明三. 对细胞凋亡研究的认识——疾病与细胞凋亡[J].河南中医学院学报,2003,18(3):27-31. 细胞凋亡是一种可由基因控制的细胞自我消亡过程。主要有影响细胞增生的激素的生长因子 ,是当前生命科学中引人注目的研究热点。可发生于胚胎发育、组织重建、免疫调节及肿瘤退化的各个时期 ,该研究有利于医学理论的完善 ,有助于中西医学的沟通和发展 DOI:10.3969/j.issn.1674-8999.2003.03.013 URL [本文引用:1]
[11]	宋萍,郑成云.白细胞介素-2协同白细胞介素18活化自然杀伤细胞活性的作用[J].西安交通大学学报(医学版),2006,27(3):227-229. 目的研究白细胞介素-2(IL-2)和白细胞介素-18(IL-18)诱导自然杀伤(NK)细胞活化和抗骨髓瘤细胞活性的协同作用.方法流式细胞仪方法检测NK细胞表面CD69的表达;阴性细胞纯化法用于获得高纯度的NK细胞;ELISA测定NK细胞培养上清液中干扰素(IFN-γ)的浓度;标准铬51释放试验评估NK细胞杀伤骨髓瘤细胞的能力.结果与单一应用IL-18相比,低浓度IL-2和IL-18联合应用显著提高了NK细胞的活性、分泌干扰素(IFN-γ)的水平和杀伤骨髓瘤细胞的作用.结论低浓度IL-2具有协同IL-18活化NK细胞抗骨髓瘤细胞的作用,此结果为IL-2和IL-18联合应用治疗骨髓瘤奠定了一定的理论基础. DOI:10.3969/j.issn.1671-8259.2006.03.006 URL [本文引用:1]
[12]	胡文学. 慢性湿疹患者皮损IL-18的表达及意义[J].中华皮肤科杂志,2009,42(2):129-131. 目的探讨IL-18在慢性湿疹发病中的作用。方法采用RT-PCR方法测定慢性湿疹患者皮损中IL-18、IFN-γmRNA表达水平，ELISA方法测定血清中IL-18、IFN-γ蛋白水平。用EASI标准对慢性湿疹患者病情进行评分。结果慢性湿疹患者皮损和健康对照组皮肤组织IL-18mRNA分别为（1．04±0．29）pg／mL、（0．52±0，15）pg／mL，IFN-γmRNA分另U为（0．96±0．34）pg／mL、（0．47±0．12）pg／mL。慢性湿疹患者皮损中IL-18mRNA、IFN-γmRNA高于正常对照组，差异具有统计学意义（P〈0．01），二者与慢性湿疹病情评分呈正相关。慢性湿疹患者和健康对照血清中IL-18蛋白分别为（475．8±59．4）pg／mL、（123．6±29．5）pg／mL，IFN-γ蛋白水平分别为（10．1±7．0）pg／mL、（11．1±3．4）pg／mL。血清中IL-18蛋白水平高于正常对照组，差异具有统计学意义（P〈0．01），IFN-γ蛋白水平低于正常对照组，但差异无统计学意义（P〉0．01），二者与慢性湿疹病情评分无明显相关性。结论IL-18可能参与慢性湿疹的发病过程，在皮损局部，可能与其诱导产生IFN-γ等Th1型细胞因子，介导超敏反应有关。 DOI:10.3760/cma.j.issn.0412-4030.2009.02.023 URL [本文引用:1]
[13]	赵宏伟. 清热除湿汤治疗湿热浸淫型湿疹疗效观察及对血清T细胞亚群的影响[J].中国中西医结合皮肤性病学杂志,2015,14(1):43-44. 目的观察清热除湿汤治疗湿热浸淫型湿疹临床疗效及对患者血清T细胞亚群的影响。方法将74例湿疹患者按照随机数字表法随机分为治疗组(37例)和对照组(37例),治疗组给予清热除湿汤(规格为200 m L/袋,早晚各1袋口服)。对照组予黄柏胶囊(4粒/次,3次/d,口服)。2组患者同时配合我院院内制剂皮炎洗剂外洗湿敷,治疗期间停用其他药物,治疗时间均为28 d。治疗结束后观察2组临床疗效、不良反应及治疗前后血清T细胞亚群的变化情况。结果治疗组总有效率(86.5%)高于对照组(64.9%),2组比较差异有统计学意义(χ2=4.98,P0.05);治疗期间未见不良反应;2组治疗后血清CD4+、CD4+/CD8+较治疗前明显升高,差异有统计学意义 (P0.05);CD8+较治疗前无明显变化(P0.05)。2组患者治疗后CD4+、CD4+/CD8+比较,治疗组升高明显,组间比较差异有统计学意义(P0.05)。结论清热除湿汤治疗湿热浸淫型湿疹有明显疗效,无不良反应,可有效改善患者的免疫功能,调节T细胞亚群紊乱。 URL [本文引用:1]
[14]	周建华,高顺强,林元珠.T细胞的关系[J].中国麻风皮肤病杂志,2007,23(9):769-772. [本文引用:1]

甘草酸软膏治疗豚鼠慢性湿疹模型的实验研究

2012

... 湿疹是由多种因素引起的具有明显渗出倾向性的炎症性皮肤病,其病因复杂,临床表现多样,如丘疱疹、渗液、肥厚增生等.而慢性湿疹往往呈现出皮损处浸润肥厚、结痂、脱屑及苔藓样变等,严重影响患者的身心健康.现代研究表明甘草酸具有肾上腺皮质激素样及抗炎、抗变态反应等作用.临床在复方甘草酸制剂内服治疗慢性湿疹有效的基础上,笔者将甘草酸制成软膏制剂,课题组在前期的研究中发现甘草酸软膏具有抗炎、止痒及治疗慢性湿疹的药效作用^[1].能降低皮损处皮肤一氧化氮(nitric oxide,NO)含量,并对耳廓皮肤的病理改变有一定的改善作用^[2].本研究采用甘草酸软膏治疗慢性湿疹小鼠模型,观察其外周血清白细胞介素(interleukin,IL)2、IL-4、IL-5、IL-6、IL-18、γ干扰素(interferon-γ,IFN-γ)含量,外周血C D 4 + T淋巴细胞、C D 8 + T淋巴细胞及其比值作为主要观察指标,以进一步探讨甘草酸软膏对慢性湿疹Th1/Th2免疫机制的影响. ...

甘草酸软膏对慢性湿疹豚鼠皮肤NO和病理形态学改变的影响

2015

Repeated application of dinitrochlorobenzene to the ears of sensitized guinea pigs: a preliminary characterization of a potential new animal model for contact eczema in humans

1992

化湿汤结合润肤止痒膏对湿疹小鼠细胞免疫功能的影响

2015

桂枝挥发油与桂皮醛对病毒性肺炎小鼠细胞因子及T细胞亚群的影响

2015

... 动物分组及造模方法同“1.4.1”,给药14 d后,小鼠摘眼球取血,EP试管中加入肝素抗凝.以2 500 r·min^-1(r=62 mm),离心5 min,弃上层清,收集红细胞,根据文献方法加入磷酸盐缓冲液(PBS)进行洗涤、离心后分别装入EP管中^[5].分别加入抗小鼠CD3e,CD₄及CD₈A 单克隆抗体,充分混匀,反应45 min后上流式细胞仪检测分析. ...

甘草的主要成分及其药理作用的研究进展

2013

... 甘草在临床上的使用迄今为止已有两千多年的历史.传统医学认为甘草具有补脾益气、祛痰止咳、缓急止痛、清热解毒、调和诸药等作用.现代药理研究发现,甘草酸作为甘草最主要的活性物质,其具有抗炎、调节免疫、抗病毒、抗肿瘤、抗纤维化等作用,其中抑制免疫和抗炎症反应是最主要的作用^[6-7]. ...

甘草酸类固醇样药理作用及机制研究进展

2010

白芍总苷胶囊治疗慢性湿疹的疗效观察及对外周血IFN-γ、IL-4水平的影响

2015

... 慢性湿疹是Ⅳ型变态反应,最主要是由于Th1/Th2出现失衡而导致.Th1与细胞免疫及迟发型超敏性炎症形成有关,而Th2可辅助B细胞分化为抗体分泌细胞,与体液免疫相关.由产生IL-2、IL-18、和IFN-γ等细胞因子的C D 4 + T细胞(Th1)以及产生IL-4、IL-5和IL-6等细胞因子的C D 4 + T细胞(Th2)控制着该反应的严重程度和持续时间.作为Th1细胞分泌的IFN-γ和Th2细胞分泌的IL-4是一对相互抑制的细胞因子,两者是反映Th1、Th2细胞免疫应答参与程度的重要指标.IFN-γ可促进Th1细胞的成熟,抑制Th2细胞的增殖^[8].而IL-4能促进Th2细胞扩增,同时抑制Th1细胞增殖并下调Th1细胞介导的免疫应答^[9-10].二者的相互拮抗,维持了Th1/Th2 的平衡.IL-18是一种强有力的前炎症递质,可以激活Th1反应,在各种过敏性疾病、自身免疫性疾病中起免疫调节作用^[11].另外IL-18也可诱导T淋巴细胞生成IFN-γ,从而影响慢性湿疹的发病过程.研究发现,慢性湿疹患者的皮损和血清中的IL-18水平与湿疹的严重程度,持续时间及病变范围有一定关系^[12].IL-5、IL-6具有拮抗Th1类细胞因子的作用,可以有效抑制炎症性细胞因子和化学因子前体的产生,同时增强其自然拮抗物的表达,从而进一步抑制了免疫排斥反应的发生. ...

蛤壳油糊外用对小鼠湿疹模型及豚鼠瘙痒模型的影响

2013

对细胞凋亡研究的认识——疾病与细胞凋亡

2003

白细胞介素-2协同白细胞介素18活化自然杀伤细胞活性的作用

2006

慢性湿疹患者皮损IL-18的表达及意义

2009

清热除湿汤治疗湿热浸淫型湿疹疗效观察及对血清T细胞亚群的影响

2015

... 迟发性超敏反应是T淋巴细胞介导的主要细胞免疫现象.当Ⅳ型迟发型变态反应发生时,T细胞受到抗原刺激后转化为致敏的淋巴细胞,产生临床症状.C D 4 + 和C D 8 + 的比值上升,提示免疫应答的正向调节优势,而比值下降,提示免疫功能低下.慢性湿疹患者免疫异常是其发病的关键环节^[13].有研究表明,湿疹患者外周血 C D 4 + 减少,而C D 8 + 增加,从而导致C D 4 + /C D 8 + 比值下降,说明湿疹患者外周血T细胞亚群出现紊乱^[14]. ...

T细胞的关系

2007