高效液相色谱法测定双花草珊瑚含片中3种活性成分的含量

唐德智

广西南宁食品药品检验所,南宁 530001

TANG Dezhi^,

Guangxi Nanning Institute for Food and Drug Control, Nanning 530001, China

作者简介唐德智(1974-),男,广西蒙山人,副主任中药师, 研究方向:中药制剂质量控制。电话:0771-3132340, E-mail:tangdz7497@163.com。

中图分类号: R286 文献标识码: B 文章编号: 1004-0781(2017)02-0188-04

摘要: 目的建立高效液相色谱(HPLC)法测定双花草珊瑚含片中绿原酸、异嗪皮啶和迷迭香酸含量。方法色谱柱为Agilent TC-C₁₈ (4.6 mm×250 mm,5 μm );流动相为乙腈(A)-0.2%磷酸溶液(B)系统,进行梯度洗脱,流速为1.0 mL·min^-1,柱温:30 ℃,波长切换时间序列采样:0~10 min为327 nm;10~35 min为342 nm。结果绿原酸进样量范围为0.052~0.939 μg线性关系良好(r=0. 999 8,n=6),平均回收率为99.23%,RSD为1.4%(n=9);异嗪皮啶进样量在0.004~0.077 μg范围内线性关系良好(r=0.999 8, n=6),平均回收率100.33%,RSD为1.8%(n=9);迷迭香酸进样量在0.012~0.213 μg范围内线性关系良好(r=0.999 9,n= 6), 平均回收率为99.42%,RSD为1.4%(n=9)。结论该方法准确、快捷、可靠,可更好地用于双花草珊瑚含片中绿原酸、异嗪皮啶和迷迭香酸的质量控制。

关键词: 双花草珊瑚含片 ; 绿原酸 ; 异嗪皮啶 ; 迷迭香酸 ; 色谱法,高效液相

Abstract:

ObjectiveTo establish a HPLC method for determination of three active components in Shuanghua Caoshanhu Hanpian. MethodsAgilent TC-C₁₈ (4.6 mm×250 mm, 5 μm) column was used. The mobile phase was acetonitrile-water containing 0.2% phosphoric acid with gradient elution mode at a flow rate of 1.0 mL·min^-1,the column temperature was 30 ℃, the detection wavelength was 327 nm (0-10 min) for chlorogenic acid, 342 nm (10-35 min) for isofraxidin and rosmarinic acid. ResultsChlorogenic acid had a good linearity in the range of 0.052-0.939 μg (r=0.999 8,n=6), the average recovery was 99.23% with RSD of 1.4% (n=9). Isofraxidin had a good linearity in the range of 0.004-0.077 μg (r=0. 999 8,n=6), the average recovery was 100.33% with RSD of 1.8% (n=9). Rosmarinic acid had a good linearity in the range of 0.012-0.213 μg (r=0.999 9,n=6), the average recovery was 99.42% with RSD of 1.4% (n=9). ConclusionThe method is simple, accurate and reliable. It can be used to determine chlorogenic acid, isofraxidin and rosmarinic acid in Shuanghua Caoshanhu hanpian at the same chromatogram condition.

Key words: hanpian ; Chlorogenic acid ; Isofraxidin ; Rosmarinic acid ; Chromatography, high performance liquid

双花草珊瑚含片为耳鼻喉科喉痹类药物,主要功能是疏风解热、利咽止痛,可改善咽喉干灼、疼痛、声音嘶哑等病症。双花草珊瑚含片主要成分有肿节风、金银花和薄荷脑。金银花自古被誉为清热解毒的良药,性甘寒气芳香,甘寒清热而不伤胃,芳香透达又可祛邪,既能宣散风热,还善清解血毒,用于各种热性病,如身热、发疹、发斑、热毒疮痈、咽喉肿痛等证,《中华人民共和国药典》2010年版一部中将绿原酸作为金银花的质量控制指标^[1]。肿节风性微温,味苦、辛,具有清热凉血、活血消斑、祛风通络的功效,《中华人民共和国药典》2010年版一部中将异嗪皮啶、迷迭香酸作为肿节风的质量控制指标^[1]。双花草珊瑚含片的研究文献较少,现行质量标准为测定肿节风中异嗪皮啶的含量,而对于金银花中的有效成分绿原酸和肿节风中具有抗菌消炎功效的成分迷迭香酸均无含量测定,不能全面反映其内在质量。笔者选择绿原酸、异嗪皮啶和迷迭香酸作为质量控制指标,采用高效液相色谱法,应用梯度洗脱、波长切换检测的方法对双花草珊瑚含片中绿原酸、异嗪皮啶和迷迭香酸进行定量测定。报道如下。

1 仪器与试药

1.1 仪器

Agilent 1200液相色谱仪,配备G1314B可变波长紫外检测器(美国安捷伦科技有限公司);S180H型超声波清洗器(德国Elma公司);XS205DU型电子分析天平(梅特勒-托利多仪器有限公司,感量:0.01 mg/0.1 mg);UV-2550型紫外-可见分光光度计(日本岛津公司)。

1.2 试药

绿原酸对照品(批号:111753-201415,含量:96.2 %),异嗪皮啶对照品(批号:110837-201206,含量:99.5%),迷迭香酸对照品(批号:111871-201203,含量:98.8%),均购自中国食品药品检定研究院;双花草珊瑚含片(广西昌弘制药有限公司,规格:每片0.5 g,批号:130309,130601,140312,140506,140615);甲醇、乙腈、磷酸为色谱纯,水为超纯水。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱: Agilent TC-C₁₈ (4.6 mm×250 mm,5 μm );乙腈为流动相A,0.2%磷酸水溶液为流动相B,采用梯度洗脱,双波长检测,程序见表1;流速:1.0 mL·min^-1;柱温:30 ℃;进样量:10 μL。

时间/min	流动相A/%	流动相B/%	波长/nm
0~10	12	88	327
~15	12→20	88→80	342
~35	20	80	342

表1 流动相梯度洗脱色谱条件

Tab.1 Gradient elution condition of the mobile phase

2.2 混合对照品储备溶液的制备

分别精密称取绿原酸对照品21.68 mg、异嗪皮啶对照品1.73 mg和迷迭香酸对照品适量4.80 mg,置同一100 mL棕色量瓶中,加甲醇溶解并定容,制成每毫升含绿原酸208.6 μg、异嗪皮啶17.2 μg和迷迭香酸47.4 μg的混合对照品储备溶液,避光保存。

2.3 供试品溶液的制备

取本品10片,研细,取1 g,精密称定,置20 mL棕色量瓶中,加入50%甲醇约15 mL,超声处理(功率300 W,频率33 kHz)30 min,放冷,用50%甲醇稀释至刻度,摇匀,滤过,取续滤液,即得,溶液避光保存。

2.4 专属性实验

按处方比例及制备方法制备不含金银花和肿节风的阴性样品,按供试品溶液的制备及测定方法进行处理和测定。结果表明阴性样品在与供试品中绿原酸、异嗪皮啶和迷迭香酸保留时间相应位置上未见色谱峰,说明其他药对测定无干扰。见图1。

图1 双花草珊瑚含片HPLC色谱图 A.缺金银花、肿节风阴性样品;B.混合对照品;C.供试品;1.绿原酸;2.异嗪皮啶;3.迷迭香酸

Fig.1 HPLC chromatograms of Shuanghua Caoshanhu hanpian A.negative sample without Lonicerae japonicae flos and Sarcandrae herba;B. mixed reference substances;C. sample;1. chlorogenic acid;2. isofraxidin;3.rosmarinic acid

2.5 线性关系考察

精密吸取“2.2”项下混合对照品储备溶液0.5,1.0,3.0,5.0,7.0,9.0 mL,分别置20 mL棕色量瓶中,加甲醇至刻度,制备得6个浓度的系列混合对照品溶液,按“2.1”项色谱条件进行测定。以对照品的进样量为横坐标(X),以峰面积值为纵坐标(Y)进行线性回归,绘制标准曲线。绿原酸回归方程:Y=2.649×10²X+5.967,r=0.999 8(n=6);异嗪皮啶回归方程:Y=3.285×10²X+24.33,r=0.999 8(n=6);迷迭香酸回归方程:Y=6.502×10²X+30.12,r=0.999 9(n= 6)。结果表明,绿原酸在0.052~0.939 μg、异嗪皮啶在0.004~0.077 μg、迷迭香酸在0.012~0.213 μg范围内呈现良好的线性关系。

2.6 仪器精密度实验

取“2.5”项下中间浓度混合对照品溶液(含绿原酸0.052 2 mg·mL^-1、异嗪皮啶0.004 3 mg·mL^-1、迷迭香酸0.011 8 mg·mL^-1)重复进样6次,测定峰面积,结果绿原酸、异嗪皮啶和迷迭香酸峰面积RSD分别为1.3%,0.9%,1.3%,表明精密度良好。

2.7 稳定性实验

取同一供试品溶液,分别在放置1,2,4,8,12,24 h后注入液相色谱仪,按上述色谱条件测定,结果绿原酸、异嗪皮啶和迷迭香酸峰面积的RSD分别为 1.5%,1.6%和1.3%,表明供试品溶液在24 h内稳定性较好。

2.8 重复性实验

取同一批号双花草珊瑚含片(批号:140312), 按“2.3”项下方法平行制备6份供试品溶液,按上述色谱条件测定,测得样品中绿原酸平均含量为1.038 mg·g^-1 ,RSD为1.3%;异嗪皮啶平均含量为0.082 mg·g^-1,RSD为1.5%;迷迭香酸平均含量为0.231 mg·g^-1 ,RSD为1.5%。表明该方法重复性良好。

2.9 加样回收率实验

取已测定含量的双花草珊瑚含片(批号:140312)数片,研细。精密称取0.5 g(共9份),置20 mL棕色量瓶中, 分别精密加入混合对照品溶液(含绿原酸0.105 4 mg·mL^-1、异嗪皮啶0.008 5 mg·mL^-1、迷迭香酸0.023 6 mg·mL^-1)4.0,5.0和6.0 mL(各3份),按照“2.3”项下方法制备供试品溶液,测定并计算回收率。结果绿原酸、异嗪皮啶和迷迭香酸的平均回收率分别为99.23%,100.33%和99.42%,RSD分别为1.4%,1.8%和1.4%(n=9)。结果见表2~4。

称样量/g	原有含量	加入量 mg	测得量	回收率/%
0.503 9	0.523	0.422	0.948	100.71
0.503 6	0.523	0.422	0.939	98.58
0.502 9	0.522	0.422	0.937	98.34
0.502 3	0.521	0.527	1.056	101.52
0.501 9	0.521	0.527	1.039	98.29
0.503 7	0.523	0.527	1.047	99.43
0.506 5	0.526	0.632	1.142	97.47
0.503 4	0.523	0.632	1.158	100.47
0.504 6	0.524	0.632	1.145	98.26

表2 绿原酸加样回收率实验结果

Tab.2 Results of recovery test on chlorogenic acidn=9

称样量/g	原有含量	加入量 mg	测得量	回收率/%
0.503 9	0.041	0.034	0.075	100.00
0.503 6	0.041	0.034	0.076	102.94
0.502 9	0.041	0.034	0.075	100.00
0.502 3	0.041	0.042	0.083	100.00
0.501 9	0.041	0.042	0.084	102.38
0.503 7	0.041	0.042	0.082	97.62
0.506 5	0.042	0.051	0.094	101.96
0.503 4	0.041	0.051	0.092	100.00
0.504 6	0.041	0.051	0.091	98.04

表3 异嗪皮啶加样回收率实验结果

Tab.3 Results of recovery test on isofraxidinn=9

称样量/g	原有含量	加入量 mg	测得量	回收率/%
0.503 9	0.116	0.094	0.209	98.94
0.503 6	0.116	0.094	0.208	97.87
0.502 9	0.116	0.094	0.211	101.06
0.502 3	0.116	0.118	0.233	99.15
0.501 9	0.116	0.118	0.235	100.85
0.503 7	0.116	0.118	0.232	98.31
0.506 5	0.117	0.142	0.256	97.89
0.503 4	0.116	0.142	0.257	99.30
0.504 6	0.117	0.142	0.261	101.41

表4 迷迭香酸加样回收率实验结果

Tab.3 Results of recovery test on rosmarinic acidn=9

2.10 样品测定

分别取5个批号双花草珊瑚含片各10片,研细,精密称取1 g(每个批号各3份),按“2.3”项下方法制备供试品溶液, 按上述色谱条件测定3种待测组分的峰面积,将峰面积代入回归方程,计算样品中绿原酸、异嗪皮啶和迷迭香酸的含量,结果见表5。

批号	绿原酸/ (mg·g^-1)	RSD/ %	异嗪皮啶/ (mg·g^-1)	RSD/ %	迷迭香酸/ (mg·g^-1)	RSD/ %
130309	1.034	1.2	0.083	1.5	0.229	0.9
130601	1.029	1.1	0.084	1.2	0.233	1.2
140312	1.038	1.3	0.082	1.5	0.231	1.5
140506	1.031	1.4	0.081	1.3	0.236	1.1
140615	1.023	1.3	0.087	1.4	0.239	0.9

表5 样品含量测定结果

Tab.5 Determination results of the content of samples n=3

3 讨论

双花草珊瑚含片现行质量标准中只对肿节风中的异嗪皮啶进行定量测定,不能全面反映该药品的质量。笔者在本实验采用HPLC法,应用梯度洗脱、波长切换检测的方法,同时对该药品有效成分绿原酸、异嗪皮啶和迷迭香酸进行定量分析,实验结果表明所用方法操作简便、专属性好、结果准确,可用于该制剂的质量控制。

在制备阴性样品的过程中,经查阅文献可知,金银花药材和肿节风药材中均含有绿原酸成分。因此按双花草珊瑚含片的处方和制备工艺,制备缺金银花、肿节风的阴性样品。

在实验过程中对供试品溶液的处理方法进行了考察。采用甲醇索氏提取、加热回流及超声振荡提取,结果表明,超声振荡提取效果较好,故采用超声振荡法提取;再分别以乙醇、甲醇、30%甲醇、50%甲醇、70%甲醇作为提取溶剂,采用超声振荡法对供试品进行提取,并对超声振荡时间进行考察。结果表明,以50%甲醇超声提取30 min效果最好。

用紫外分光光度计分别对对照品溶液在200~400 nm波长范围内进行扫描,绿原酸在327 nm波长有最大吸收,异嗪皮啶、迷迭香酸在342 nm波长处有最大吸收,与《中华人民共和国药典》金银花、肿节风2味中药有效成分标注的检测波长一致,由此确定上述有效成分的吸收波长。为达到检测灵敏度高、干扰小的目的,本实验利用Agilent 1200紫外检测器可变波长功能,建立HPLC波长切换法同时测定双花草珊瑚含片中3个有效成分的含量,以保证各成分在最大吸收波长处检测,获得最佳检测效果。

笔者参考《中华人民共和国药典》及相关文献中绿原酸、异嗪皮啶和迷迭香酸的含量测定方法^[2-7],采用等度洗脱法进行实验,分离结果均不理想,故考虑梯度洗脱。实验中比较了甲醇-1%冰醋酸水溶液、甲醇-0.2%磷酸溶液、乙腈-1%冰醋酸水溶液和乙腈-0.2%磷酸溶液等4种流动相系统,结果显示采用乙腈-0.2%磷酸溶液作为流动相进行梯度洗脱,待测组分出峰时间理想,分离效果和峰形均较好,适于该药品上述组分的检测分析。

The authors have declared that no competing interests exist.

参考文献

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[1]	国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[M] .北京:中国医药科技出版社,2010:205-206,207-208,384-385. [本文引用:2]
[2]	肖小武,李婷婷,宁火华,等.HPLC测定肿节风片中异嗪皮啶和迷迭香酸的含量[J].中成药,2010,32(7):1145-1147. 目的:测定肿节风片中异秦皮啶和迷迭香酸的含量。方法:HPLC法;采用Diamonsil C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm);流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液(20∶80);流速:1.0mL/min,柱温:35℃,检测波长为 342nm。结果:异秦皮啶和迷迭香酸的线性良好,R2值分别为:0.99999和0.99992;平均回收率(n=6)分别为98.7% (RSD=2.22%)和96.9%(RSD=2.76%)。结论:该方法可行,准确度、重复性良好,可用于控制肿节风片的质量。 URL [本文引用:1]
[3]	邓伟麟,吴莹莹,毕丹,等.肿节风药材的HPLC的指纹图谱研究及其异嗪皮啶与迷迭香酸的含量测定[J].中国药房,2013,24(47):4472-4474. 目的：研究肿节风药材的高效液相色谱（HPLc）指纹图谱，并测定药材中异嗪皮啶与迷迭香酸的含量，以建立药材有效的质量评价方法。方法：色谱柱为Inertsil ODS-4（250mm×4．6mm，5μm），流动相为0．1％磷酸溶液．乙腈（梯度洗脱），流速为1．0ml／min，检测波长为342nm。结果：所得肿节风药材的HPLC指纹图谱分离度、精密度、重复性和稳定性均良好；10批肿节风药材指纹图谱的平均相似度为0．853，不同产地样品的指纹图谱差异不大，但4个代表性色谱峰的峰面积有所区别。异嗪皮啶与迷迭香酸的质量浓度均在5-500mg／ml范围内与各自峰面积积分值呈良好的线性关系（r分别为0．9995、0．9989）；平均加样回收率分别为105．20％、99．52％，RSD分别为1．39％、1．56％（n均为6）；10批肿节风药材中异嗪皮啶与迷迭香酸的含量存在明显差异，尤以迷迭香酸含量差异较大。结论：该方法简便、准确、重复性好，可以作为肿节风药材的质量控制方法。 URL [本文引用:0]
[4]	张启云,邹云香,徐国良,等.HPLC法同时测定肿节风提取物中绿原酸、异嗪皮啶、迷迭香酸的含量[J].中药新药与临床药理,2013,24(3):294-297. 目的建立运用HPLC法同时测定肿节风提取物中绿原酸、异嗪皮啶和迷迭香酸含量的方法。方法采用Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C1(84.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱;流动相:乙腈(A)-0.1%甲酸(B),梯度洗脱0～30 min,5%→20%A;30～40 min,20%→25%A;40～60 min,25%→29%A;60～65 min,29%→32%A;流速:1 mL.min-1;检测波长:330 nm;柱温:30℃;进样量:20μL。结果绿原酸、异嗪皮啶、迷迭香酸分别在0.0280~0.448μg(r=0.9998)、0.0164~0.262μg(r=0.9999)、0.113~1.81μg(r=0.9999)范围内呈良好的线性关系;平均回收率(n=6)分别为103.4%(RSD=2.77%)、98.3%(RSD=2.58%)、95.2%(RSD=2.49%)。结论该法简便快速,重复性好,准确可靠,可用于同时测定肿节风提取物中绿原酸、异嗪皮啶、迷迭香酸的含量。 URL [本文引用:0]
[5]	程会,汤庆发,陈飞龙,等.UPLC测定不同粒度肿节风有效成分的含量[J].中药新药与临床药理,2014,25(4):480-482. 目的建立超高效液相色谱（UPLC）法同时测定肿节风超微粉中异嗪皮啶和迷迭香酸的含量,并比较不同粒度肿节风有效成分溶出率差异。方法采用UPLC法,Eclipse Plus C18（2.1 mm×50 mm,1.8μm）,流动相为甲醇（A）-0.1%磷酸（B）,梯度洗脱,流速为0.4 mL·min-1,柱温为35益,紫外检测波长为342 nm。结果异嗪皮啶和迷迭香酸分别在9.97～59.84μg·mL^-1（r=0.99995）,10.90～60.14μg·mL^-1（r=0.99935）范围内线性关系良好,平均回收率（n=6）分别为95.16%（RSD=2.15%）,100.31%（RSD=2.29%）。结论所建立的UPLC法操作简便快捷、经济、准确可靠、分离度好,可为肿节风药材有效成分分析和质量控制提供新的方法。 URL [本文引用:0]
[6]	秦庆芳. 高效液相色谱法同时测定万通炎康片中3种有效成分的含量[J].医药导报,2015,34(4):524-527. 目的建立高效液相色谱法同时测定万通炎康片中异嗪皮啶、迷迭香酸和苦玄参苷ⅠA的含量。方法采用Diamonsil C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱;流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液,梯度洗脱(0→18→22→42→42.01→45 min,乙腈24%→24%→41%→41%→24%→24%);流速0.6 m L·min-1;检测波长:0~16 min为344 nm,16.01~22 min为327 nm,22.01~45 min为264 nm,柱温40℃。结果该方法可在45 min内完成对3种成分的色谱分析,且主成分峰与相邻的色谱峰之间分离度均1.5;异嗪皮啶、迷迭香酸和苦玄参苷ⅠA的线性范围分别为0.006 006~0.120 200μg(r=1),0.004 992~0.099 840μg(r=0.999 9),0.080 72~1.614 40μg(r=1);平均加样回收率(n=9)分别为103.71%(RSD=0.96%),96.75%(RSD=1.2%),101.75% (RSD=0.95%)。结论该方法简便,准确,可用于万通炎康片的质量控制。 DOI:10.3870/yydb.2015.04.030 URL [本文引用:0]
[7]	段杨,刘应华, 宋愿智.高效液相色谱法测定小儿咽扁颗粒中绿原酸含量[J].中国药业,2014,23(3):38-39. 目的建立测定小儿咽扁颗粒中绿原酸含量的高效液相色谱法。方法填充剂为十八烷基硅烷键合硅胶，乙腈-0．4％磷酸溶液（13：87）为流动相，检测波长为327nm，流速为1．0mL／min。结果绿原酸进样量在0．2～2．0μg范围内与峰面积积分值呈良好线性关系（r=0．9999），平均回收率为99．64％，RSD为0．82％。结论该方法简便、易行、准确、专属性及重复性良好，可用于小儿咽扁颗粒的质量控制。 URL [本文引用:1]

... 双花草珊瑚含片为耳鼻喉科喉痹类药物,主要功能是疏风解热、利咽止痛,可改善咽喉干灼、疼痛、声音嘶哑等病症.双花草珊瑚含片主要成分有肿节风、金银花和薄荷脑.金银花自古被誉为清热解毒的良药,性甘寒气芳香,甘寒清热而不伤胃,芳香透达又可祛邪,既能宣散风热,还善清解血毒,用于各种热性病,如身热、发疹、发斑、热毒疮痈、咽喉肿痛等证,《中华人民共和国药典》2010年版一部中将绿原酸作为金银花的质量控制指标^[1].肿节风性微温,味苦、辛,具有清热凉血、活血消斑、祛风通络的功效,《中华人民共和国药典》2010年版一部中将异嗪皮啶、迷迭香酸作为肿节风的质量控制指标^[1].双花草珊瑚含片的研究文献较少,现行质量标准为测定肿节风中异嗪皮啶的含量,而对于金银花中的有效成分绿原酸和肿节风中具有抗菌消炎功效的成分迷迭香酸均无含量测定,不能全面反映其内在质量.笔者选择绿原酸、异嗪皮啶和迷迭香酸作为质量控制指标,采用高效液相色谱法,应用梯度洗脱、波长切换检测的方法对双花草珊瑚含片中绿原酸、异嗪皮啶和迷迭香酸进行定量测定.报道如下. ...

... [1].双花草珊瑚含片的研究文献较少,现行质量标准为测定肿节风中异嗪皮啶的含量,而对于金银花中的有效成分绿原酸和肿节风中具有抗菌消炎功效的成分迷迭香酸均无含量测定,不能全面反映其内在质量.笔者选择绿原酸、异嗪皮啶和迷迭香酸作为质量控制指标,采用高效液相色谱法,应用梯度洗脱、波长切换检测的方法对双花草珊瑚含片中绿原酸、异嗪皮啶和迷迭香酸进行定量测定.报道如下. ...

HPLC测定肿节风片中异嗪皮啶和迷迭香酸的含量

2010

... 笔者参考《中华人民共和国药典》及相关文献中绿原酸、异嗪皮啶和迷迭香酸的含量测定方法^[2-7],采用等度洗脱法进行实验,分离结果均不理想,故考虑梯度洗脱.实验中比较了甲醇-1%冰醋酸水溶液、甲醇-0.2%磷酸溶液、乙腈-1%冰醋酸水溶液和乙腈-0.2%磷酸溶液等4种流动相系统,结果显示采用乙腈-0.2%磷酸溶液作为流动相进行梯度洗脱,待测组分出峰时间理想,分离效果和峰形均较好,适于该药品上述组分的检测分析. ...

肿节风药材的HPLC的指纹图谱研究及其异嗪皮啶与迷迭香酸的含量测定

2013

HPLC法同时测定肿节风提取物中绿原酸、异嗪皮啶、迷迭香酸的含量

2013

UPLC测定不同粒度肿节风有效成分的含量

2014

高效液相色谱法同时测定万通炎康片中3种有效成分的含量

2015

高效液相色谱法测定小儿咽扁颗粒中绿原酸含量

2014