清口颗粒与无糖清口颗粒质量控制

雷丸¹^,²^,, 康玉霞², 王莹², 郭飞燕², 周婷¹, 王晓娟²^,

1.陕西中医药大学药学院,咸阳 712046

2.军事口腔医学国家重点实验室,国家口腔疾病临床医学研究中心,陕西省口腔生物工程技术研究中心,第四军医大学口腔医院药剂科,西安 710032

LEI Wan¹^,²^,, KANG Yuxia², WANG Ying², GUO Feiyan², ZHOU Ting¹, WANG Xiaojuan²^,

1. College of Pharmacy, Shanxi University of Chinese Medicine, Xianyang 712046, China

2. State Key Laboratory of Military Stomatology & National Clinical Research Center for Oral Diseases & Shanxi Engineering Research Center for Dental Matrrisls and Advanced Manufacture, Department of Pharmacy, Hospital of Stomatology, the Fourth Military Medical University, Xi’an 710032, China;

通信作者王晓娟(1962-),女,陕西咸阳人,主任药师,从事天然药物化学与中药新制剂研究。电话:029-84776189,E-mail:wxjyh231@fmmu.edu.cn。

作者简介雷丸(1991-),女,陕西渭南人,药师,硕士,研究方向:中药药剂学。电话:029-84773998,E-mail:18785990@qq.com。

基金资助: 基金项目军队医疗机构制剂标准提高科研专项课题(14ZJZ06)

中图分类号: R286 文献标识码: B 文章编号: 1004-0781(2017)03-0312-05

摘要:

目的建立清口颗粒与无糖清口颗粒(粉葛、生地、桑叶、枸杞子、女贞子和甘草组成)的质量标准。方法采用薄层色谱法(TLC)定性鉴别处方中葛根素、毛蕊花糖苷、桑叶、枸杞子、齐墩果酸、甘草;采用高效液相色谱法(HPLC)测定制剂中葛根素;色谱柱为Diamonsil C₁₈(2)柱(250 mm×4.6 mm,5 μm);流动相为甲醇-水(25∶75);检测波长为250 nm。结果 TLC能定性检出粉葛、生地、桑叶、枸杞子、女贞子、甘草,斑点清晰,分离度好,且阴性对照无干扰。葛根素浓度在18.00~144.02 μg·mL^-1内线性关系良好(r=0.999 8,n=8);清口颗粒与无糖清口颗粒中葛根素平均加样回收率分别为101.02%(RSD=1.66%,n=9)和98.83%(RSD=1.46%,n=9)。结论所建立的方法简便,准确,专属性、重复性好,可用于清口颗粒与无糖清口颗粒的质量控制。

关键词: 清口颗粒 ; 无糖清口颗粒 ; 葛根素 ; 色谱法,薄层 ; 色谱法,高效液相

Abstract:

Objective To establish the quality standard for qingkou granules and qingkou sugarless granules. Methods Puerarin, Acteoside, Mori Folium, Lycii Fructus, Oleanolic Acid and Glycyrrhizae Radix et Rhizoma were identified by TLC. The content of puerariae was detected by HPLC. The determination was performed on Diamonsil C₁₈(2)(250 mm×4.6 mm,5 μm) column with mobile phase consisted of methanol-water (25∶75); The detection wavelength was set at 250 nm. Results TLC spots of them could be detected clearly and were specific without interference from negative control. The linear range of puerperia was 18.00—144.02 μg·mL (r=0.999 8, n=8). The average recovery of qingkou granules and qingkou sugarless granules were 101.02% (RSD=1.66%, n=9), and 98.83% (RSD=1.46%, n=9), respectively.Conclusion The method is simple,accurate,specific,reproducible,and can be used for quality control of qingkou granules and qingkou sugarless granules.

Key words: granule ; sugarless granule ; Puerperia ; Chromatography,thin-layer ; Chromatography,high performance liquid

复发性口腔溃疡是临床常见多发口腔疾病,中医认为该病虽生于口,实与肺腑经络内部相关,对于本病的治疗,初期可清热泻火。反复发作、病程长者,当补土升阳泻火为宜。清口颗粒是第四军医大学口腔医院自制制剂[制剂文号:兰制字(2011)F70009],具有益胃生津、滋补肝肾、清热解渴等功效。全方甘温升补与苦寒泻降并用,由粉葛、生地、桑叶、枸杞子、女贞子、甘草等15味中药制备而成,标本兼顾而重在治本^[1]。主要用于治疗复发性口腔溃疡反复发作、口渴喜饮、口苦、口臭,或伴见腰膝酸软、手脚心发热等病症。经多年临床使用,患者反映疗效确切,为更好地控制制剂质量,保证药品疗效,本实验对方中粉葛、生地、桑叶、枸杞子、女贞子以及甘草进行薄层鉴别,并对君药粉葛的主要有效成分葛根素进行含量测定。

1 仪器与试药

1.1 试药

葛根素对照品(批号:110752-201313,纯度:95.8%)、毛蕊花糖苷对照品(批号:111530-201411,纯度:94.4%)、齐墩果酸对照品(批号:10709-201206,纯度:94.9%)、桑叶对照药材(批号:121123-201305),枸杞子对照药材(批号:121072-200404),甘草对照药材(批号:120904-201318)均购自中国食品药品检定研究院。清口颗粒(第四军医大学口腔医院,规格:每袋12 g,批号:140812,140910,141014),无糖清口颗粒(第四军医大学口腔医院,规格:每袋6 g,批号:140819,140829,140904);阴性颗粒为本实验室自制;甲醇为色谱纯,其他试剂为分析纯,水为二次纯化水。

1.2 仪器

LC-20A高效液相色谱仪(配SPD-MZOA检测器,日本岛津公司),DL-720超声仪(浙江象山县石浦海天电子仪器厂),LD5-10离心机(北京医用离心机厂),BT125D十万分之一电子天平(德国赛多利斯公司)。

2 方法与结果

2.1 粉葛的薄层鉴别

取清口颗粒24 g(无糖清口颗粒12 g),置具塞锥形瓶中,加热水40 mL溶解并超声提取30 min,离心,取上清液,用正丁醇振摇提取4次,每次20 mL,合并正丁醇层,蒸干,残渣加甲醇2 mL使溶解,作为供试品溶液。另取缺粉葛阴性制剂同法制备阴性样品溶液。再取葛根素对照品,加甲醇制成每毫升含1 mg的溶液,作为对照品溶液。照薄层色谱法实验,吸取上述溶液各10 μL,分别点于同一硅胶GF₂₅₄薄层板上,以三氯甲烷-甲醇-水(7∶3∶0.25)为展开剂^[2],展开,取出,晾干。置紫外灯(254 nm)下检视。供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点,且阴性样品溶液无干扰,见图1。

图1 葛根素的薄层色谱图
1-3. samples of qingkou granule; 1’-3’. samples of sugarless qingkou granule; 4,4’. reference of puerperia; 5,5’. negative control solution

Fig.1 TLC figure of Puerarin

2.2 生地的薄层鉴别

取清口颗粒24 g(无糖清口颗粒12 g),置具塞锥形瓶中,加入80%甲醇50 mL超声提取30 min,滤过,滤液蒸干,残渣加水10 mL使溶解,再用水饱和的正丁醇振摇提取4次,每次20 mL,合并正丁醇层,蒸干,加甲醇2 mL使溶解,作为供试品溶液。另取缺生地阴性制剂同法制备阴性样品溶液。再取毛蕊花糖苷适量,加甲醇制成每毫升含1 mg的对照品溶液。照薄层色谱法实验,吸取上述溶液各3 μL,分别点于同一聚酰胺薄膜上,以正丁醇-冰醋酸-水(7∶1∶2)为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外灯(365 nm)下检视。供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同的颜色的荧光斑点,且阴性样品溶液无干扰,见图2。

图2 毛蕊花糖苷的薄层色谱图
1~3. samples of qingkou granule; 1’~3’. samples of sugarless qingkou granule; 4,4’. verbascoside reference; 5,5’. negative control solution

Fig.2 TLC figure of Acteoside

2.3 桑叶的薄层鉴别

取清口颗粒24 g(无糖清口颗粒12 g),置于具塞锥形瓶中,加石油醚(60~90 ℃)30 mL,回流30 min,滤过,残渣加热水10 mL置于60 ℃水浴锅上溶解,离心,上清液水浴蒸干,残渣加甲醇1 mL使溶解,作为供试品溶液^[3]。另取桑叶对照药材2 g与缺桑叶阴性制剂,同法制成对照药材溶液与阴性样品溶液。照薄层色谱法实验,吸取上述溶液各10 μL,分别点于同一硅胶G薄层板上,以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(5∶2∶1)的上层溶液为展开剂,展开,取出,晾干,置于紫外灯(365 nm)下检视。供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点,且阴性样品溶液无干扰,见图3。

图3 桑叶薄层色谱图
1~3. samples of qingkou granule; 1’~3’. samples of sugarless qingkou granule; 4,4’.Mori Folium reference; 5,5’.negative control solution

Fig.3 TLC figure of Mori Folium

2.4 枸杞子的薄层鉴别

取清口颗粒12 g(无糖清口颗粒6 g),置具塞锥形瓶中,加水35 mL。加热煮沸15 min,放冷,离心,上清液用乙酸乙酯15 mL振摇提取,提取液浓缩至1 mL,作为供试品溶液^[3]。另取枸杞子对照药材2 g与缺枸杞子阴性制剂,同法制成对照药材溶液与阴性样品溶液。照薄层色谱法实验,吸取上述溶液各5 μL,分别点于同一硅胶G薄层板上,以乙酸乙酯-三氯甲烷-甲酸(3∶2∶1)为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外灯(365 nm)下检视。供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点,且阴性样品溶液无干扰,见图4。

图4 枸杞薄层色谱图
1~3. samples of qingkou granule; 1’~3’. samples of sugarless qingkou granule; 4,4’. Lycii Fructus reference; 5,5’. negative control solution

Fig.4 TLC figure of Lycii Fructus

2.5 女贞子的薄层鉴别

取清口颗粒40 g(无糖清口颗粒20 g),研细,置于具塞锥形瓶,加入甲醇45 mL,加热回流30 min,滤过,滤液蒸干,残渣加无水乙醇-三氯甲烷(3∶2)混合液1 mL使溶解,作为供试品溶液^[4]。另取缺女贞子阴性制剂同法制成阴性样品溶液。再取齐墩果酸对照品,加乙醇制成每毫升含1 mg的溶液,作为对照品溶液。照薄层色谱法实验,吸取上述溶液各10 μL,分别点于同一硅胶G薄层板上,以环己烷-丙酮-乙酸乙酯(5∶2∶1)为展开剂,展开,取出,晾干,喷以10%硫酸乙醇溶液,加热至斑点显色清晰。供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点,且阴性样品溶液无干扰,见图5。

图5 齐墩果酸薄层色谱图
1~3. samples of qingkou granule; 1’~3’. samples of sugarless qingkou granule; 4,4’. oleanolic acid reference; 5,5’.negative control solution

Fig.5 TLC figure of Oleanolic acid

2.6 甘草的薄层鉴别

取清口颗粒24 g(无糖清口颗粒12 g),加乙醚40 mL,加热回流1 h,滤过,弃去醚液,药渣加甲醇30 mL,加热回流1 h,滤过,滤液蒸干,残渣加水40 mL使溶解,用正丁醇提取3次,每次20 mL,合并正丁醇液,用水洗涤3次,弃去水液,正丁醇液蒸干,残渣加甲醇1 mL使溶解,作为供试品溶液。另取甘草对照药材1 g与缺甘草阴性制剂,同法制成对照药材溶液与阴性样品溶液。照薄层色谱法实验,吸取上述溶液各10 μL,分别点于同一用1%氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上,以乙酸乙酯-甲酸-醋酸-水(15∶1∶1∶2)为展开剂,展开,取出,晾干,喷以10%硫酸乙醇溶液,加热至斑点显色清晰。供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点,且阴性样品溶液无干扰,见图6。

2.7 葛根素含量测定

2.7.1 色谱条件色谱柱:Diamonsil C₁₈(2)(250 mm×4.6 mm,5 μm);流动相:甲醇-水(25∶75);检测波长:250 nm;流速:1 mL·min^-1;进样量:10 μL。

2.7.2 对照品溶液配制取葛根素对照品10.44 mg精密称定,置于10 mL量瓶,加甲醇溶解定容,制成浓度为1 mg·mL^-1对照品贮备液。精密吸取对照品贮备液0.9 mL置10 mL量瓶中,加甲醇稀释、定容,即得浓度为90.01 μg·mL^-1对照品溶液。

图6 甘草薄层色谱图
1~3. samples of qingkou granule; 1’~3’. samples of sugarless qingkou granule; 4,4’. reference of Glycyrrhizae Radix Et Rhizoma; 5,5’. negative control solution

Fig.6 TLC figure of Glycyrrhizae Radix et Rhizoma

2.7.3 供试品溶液制备取清口颗粒(无糖清口颗粒)适量,研细,取约6 g,精密称定,置于100 mL具塞锥形瓶中,精密加入水25 mL,振摇,再精密加入甲醇25 mL,称重,超声提取45 min,取出,放冷,用甲醇补足减失质量,摇匀,滤过,取续滤液,即得。

2.7.4 阴性样品溶液制备取缺粉葛阴性制剂约6 g,按“2.7.3”项方法制得阴性样品溶液。

2.7.5 专属性实验精密吸取对照品溶液、供试品溶液、阴性样品溶液各10 μL,按“2.7.1”项色谱条件测定。结果显示,阴性样品溶液在葛根素相应的保留时间未出现色谱峰,表明在该色谱条件下葛根素的吸收良好,基线无干扰,清口颗粒中其他成分对葛根素测定无干扰(图7)。

图7 葛根素HPLC色谱图
A. puerarin reference;B. samples (sugarless qingkou granule);C. samples (qingkou granule); D. negative reference;1. puerarin

Fig.7 HPLC chromatograms of puerarin

2.7.6 线性关系考察精密量取对照品贮备液适量,制成18.00,36.00,54.01,72.01,90.01,108.01,126.01,144.02 μg·mL^-1对照品系列液。按照“2.7.1”项色谱条件进行高效液相色谱法测定,以峰面积(Y)对进样浓度(X)进行线性回归,得回归方程Y=39 530X+1.9×10⁵, r=0.999 8(n=8),说明葛根素浓度在18.00~144.02 μg·mL^-1内线性关系良好。

2.7.7 精密度实验精密吸取葛根素对照品溶液(90.01 μg·mL^-1)10 μL,按照“2.2.1”项色谱条件测定,连续进样6次,测定峰面积,计算得RSD值0.15%(n=6),表明该方法精密度良好。

2.7.8 重复性实验取同一批号清口颗粒(无糖清口颗粒)适量,精密称定,按照“2.7.3”项方法制备供试品溶液6份,再按照“2.7.1”项色谱条件进样,测定峰面积。结果显示,清口颗粒葛根素的平均含量为每袋3.65 mg,RSD为0.91%(n=6),无糖清口颗粒葛根素平均含量为每袋4.13 mg,RSD为0.69%(n=6),表明本方法重复性良好。

2.7.9 稳定性实验精密吸取同一清口颗粒(无糖清口颗粒)供试品溶液,于0,2,4,6,8,10,12 h分别按照“2.7.1”项色谱条件进样,测定峰面积。计算得RSD分别为0.44%(n=7),0.72%(n=7),表明供试品溶液在12 h内稳定性良好。

2.7.10 加样回收率实验分别称取约0.6 g已知含量的清口颗粒(每克含有葛根素0.30 mg)和无糖清口颗粒(每克含有葛根素0.69 mg)粉末各9份,精密称定,再分别按照高、中、低浓度精密加入一定量葛根素对照品,混合均匀,精密加水2.5 mL,摇匀,再精密加入甲醇2.5 mL,称重,超声提取45 min,取出,放冷,用甲醇补足减失质量,摇匀,按“2.7.1”项色谱条件进行测定,计算加样回收率,结果见表1,2。清口颗粒中葛根素平均加样回收率101.02%,RSD=1.66%;无糖清口颗粒中葛根素平均加样回收率98.83%,RSD=1.46%。

样品量/ mg	原有量	加入量	测得量	回收率/ %
630.14	189.04	151.00	341.23	100.79
649.91	194.97	156.00	351.16	100.12
630.22	189.07	151.00	342.31	101.48
640.27	192.08	192.00	389.44	102.79
629.82	188.95	189.00	384.19	103.30
630.11	189.03	189.00	381.09	101.62
650.19	195.06	234.00	423.21	97.50
620.32	186.10	223.00	411.57	101.11
629.71	188.91	227.00	417.04	100.50

表1 葛根素加样回收率实验结果(清口颗粒)

Tab.1 Results of recovery tests for puerperia (qingkou granule)

样品量/ mg	原有量	加入量	测得量	回收率/ %
609.94	420.86	336.69	749.53	97.62
610.33	421.13	336.90	753.46	98.64
610.17	421.02	336.81	747.51	96.94
600.54	414.37	414.37	819.12	97.68
602.31	415.59	415.59	823.85	98.24
598.92	413.25	413.25	821.19	98.71
600.11	414.08	496.89	914.61	100.73
600.32	414.22	497.06	910.07	99.76
609.77	420.74	504.89	931.43	101.15

表2 葛根素加样回收率实验结果(无糖清口颗粒)

Tab.2 Results of recovery tests for puerperia (qingkou sugarless granule)

2.7.11 3批样品含量测定精密称取3批清口颗粒与无糖清口颗粒,按“2.7.3”项供试品溶液制备方法制备,按“2.7.1”项色谱条件测定,并计算含量,结果见表3,4。根据含量测定结果,确定本品每袋含葛根素计不得少于2.5 mg。

批号	称样量/g	峰面积	每袋葛根素含量/mg
140812	6.00	1 871 257	3.66
140910	6.00	1 857 079	3.67
141014	6.00	1 878 373	3.63

表3 清口颗粒中葛根素含量测定结果

Tab.3 Determination results of puerperia (qingkou granule)

批号	称样量/g	峰面积	葛根素含量(mg/袋)
140819	6.01	4 240 477	4.14
140829	6.01	4 233 443	4.13
140904	6.01	4 227 299	4.13

表4 无糖清口颗粒中葛根素含量测定结果

Tab.4 Determination results of puerarin (sugarless qingkou granule)

3 讨论

中药制剂处方药味多,成分复杂,合适的提取方法是建立分析方法的关键。在粉葛的薄层鉴别中,笔者首先选用甲醇冷浸^[3]提取方法,发现分离效果不好,考察了甲醇、乙醇、乙酸乙酯、水等不同提取溶剂,超声、回流、萃取等提取方法^[2,5-7],结果发现纯水超声

后再用正丁醇萃取提取效果较好且杂质干扰最小,故确定了前文中的粉葛薄层色谱条件。女贞子薄层鉴别中,考察了环己烷-丙酮-乙酸乙酯(5∶2∶1)和三氯甲烷-甲醇-甲酸(40∶1∶1)两种展开剂,发现前者斑点清晰,故选择环己烷-丙酮-乙酸乙酯(5∶2∶1)作为女贞子薄层展开剂。

方中粉葛为君药,生石膏、桑叶、生地为臣药,玉竹、沙参、麦冬、天冬、女贞子、枸杞子、扁豆皆为佐药。其中生石膏、沙参、天冬、扁豆在《中华人民共和国药典》2010年版无含量测定项,而桑叶主要成分为芦丁,专属性较差,生地主要成分梓醇为环烯醚萜苷类化合物,稳定性不好,且制样方法复杂,玉竹、枸杞子主要成分为多糖,麦冬、女贞子含量较少,均不适合作为含量测定项纳入标准,故最终确定以君药粉葛主要成分葛根素作为含量测定项纳入标准。

葛根素的含量测定中供试品的制备方法分别考察了30%,50%,75%甲醇以及甲醇提取溶剂,发现先用水溶解再用甲醇提取效果最好,又考察了冷浸、超声、回流提取方法,发现超声与回流提取效果较好,考虑到超声提取简便易行,故采用超声提取。提取时间考察了15,30,45,60,90 min对葛根素含量的影响,发现45 min即可。故确定了前文中供试品制备方法。实验中曾采用甲醇-水(25∶75)、甲醇-水(30∶70)以及水-乙腈-甲醇(85∶13∶2)作为流动相,结果显示,当以甲醇-水(25∶75)为流动相时分离效果好,重复性强,专属性高,故最终选择以甲醇-水(25∶75)作为流动相。

通过本实验建立的薄层鉴别方法和高效液相色谱含量测定方法对3批样品进行质量控制,发现本方法简单易行,准确度高,重复性好,可用于清口颗粒的质量控制。

The authors have declared that no competing interests exist.

参考文献

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[4]	荚志鹏. 更年灵胶囊中女贞子的薄层鉴别[J].海峡药学,2005,17(4):100. 目的对更年灵胶囊中女贞子的薄层色谱鉴别.方法采用TLC法对处方中女贞子进行定性鉴别,在原有标准的基础上增加齐墩果酸的定性鉴别从而改进其质量标准.结果与结论方法准确,直观,能有效地控制该制剂的质量. DOI:10.3969/j.issn.1006-3765.2005.04.052 URL [本文引用:1]
[5]	宗凯,熊苗苗,谢委,等.胃肠康胶囊质量标准研究[J].医药导报,2010,29(1):92-94. 目的对胃肠康胶囊进行定性及定量方法的研究.方法采用TCL法对处方中的延胡索、黄芩、甘草进行定性鉴别研究.结果 TCL法可检出延胡索、黄芩、甘草,阴性无干扰;采用高效液相色谱法对甘草酸单铵盐含量测定进行方法学研究,结果在浓度为0.868～5.208μg范围内呈良好的线性关系,r=0.9991.平均回收率为99.72%,RSD=0.70%(n=6).结论所建立的方法简便,重复性好,回收率高,可有效的控制该制剂的质量. DOI:10.3969/j.issn.1672-2779.2010.20.158 URL [本文引用:1]
[6]	陈湖海,杨晶,吴佳妮,等.复方感冒清热颗粒的鉴别及含量测定[J].中国药师,2012,15(4):515-518. 目的:建立复方感冒清热颗粒的鉴别及含量测定方法.方法:鉴别采用薄层色谱法.采用HPLC法测定葛根素含量,Kromasil 5-C18(250 mm×4.6 mm,5 μm)色谱柱,以乙腈-水(11:89)为流动相;柱温25℃;检测波长250 nm;进样量20 μl.结果:所用薄层色谱方法可清晰鉴别样品中的葛根、白芷、柴胡和金银花4种药材.含量测定中葛根素在4.8～28.8 μg·ml-1范围内与色谱峰面积呈良好的线性关系(r＝0.999 7);低、中、高3个浓度的平均加样回收率分别为97.2%,97.3%,99.9%,RSD分别为1.2%,1.8%,1.4%.结论:该鉴别方法简便、准确、可靠;含量测定方法快速、准确、灵敏、可靠,可用作控制复方感冒清热颗粒的质量. DOI:10.3969/j.issn.1008-049X.2012.04.029 URL [本文引用:0]
[7]	盛蓉,王江林,呼梅,等.尿畅舒胶囊质量标准研究[J].中成药,2008,30(6):875-878. 目的：建立尿畅舒胶囊的质量标准。方法：用薄层色谱法鉴别处方中的粉葛、三七和黄芪；用高效液相色谱法测定粉葛中葛根素的含量。葛根素的含量测定采用C18色谱柱（4．6mm×150mm，5μm），流动相为甲醇-水（25：75），检测波长：250nm，流速：0．8mL／min，柱温：25℃。结果：薄层色谱鉴别特征斑点明显。含量测定中葛根素进样量在0．0848-1．2720μg的范围内呈良好的线性关系，R=1．0000。平均加样回收率为102．03％，RSD=1，59％。结论：所建立的薄层色谱鉴别和含量测定方法专属性强，重复性好，可用于尿畅舒胶囊的质量控制。 DOI:10.3969/j.issn.1001-1528.2008.06.029 URL [本文引用:1]

清口颗粒治疗复发性口疮64例

2006

... 复发性口腔溃疡是临床常见多发口腔疾病,中医认为该病虽生于口,实与肺腑经络内部相关,对于本病的治疗,初期可清热泻火.反复发作、病程长者,当补土升阳泻火为宜.清口颗粒是第四军医大学口腔医院自制制剂[制剂文号:兰制字(2011)F70009],具有益胃生津、滋补肝肾、清热解渴等功效.全方甘温升补与苦寒泻降并用,由粉葛、生地、桑叶、枸杞子、女贞子、甘草等15味中药制备而成,标本兼顾而重在治本^[1].主要用于治疗复发性口腔溃疡反复发作、口渴喜饮、口苦、口臭,或伴见腰膝酸软、手脚心发热等病症.经多年临床使用,患者反映疗效确切,为更好地控制制剂质量,保证药品疗效,本实验对方中粉葛、生地、桑叶、枸杞子、女贞子以及甘草进行薄层鉴别,并对君药粉葛的主要有效成分葛根素进行含量测定. ...

冠脉宁片(胶囊)现行薄层鉴别标准比较研究

2014

... 取清口颗粒24 g(无糖清口颗粒12 g),置具塞锥形瓶中,加热水40 mL溶解并超声提取30 min,离心,取上清液,用正丁醇振摇提取4次,每次20 mL,合并正丁醇层,蒸干,残渣加甲醇2 mL使溶解,作为供试品溶液.另取缺粉葛阴性制剂同法制备阴性样品溶液.再取葛根素对照品,加甲醇制成每毫升含1 mg的溶液,作为对照品溶液.照薄层色谱法实验,吸取上述溶液各10 μL,分别点于同一硅胶GF₂₅₄薄层板上,以三氯甲烷-甲醇-水(7∶3∶0.25)为展开剂^[2],展开,取出,晾干.置紫外灯(254 nm)下检视.供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点,且阴性样品溶液无干扰,见图1. ...

... 中药制剂处方药味多,成分复杂,合适的提取方法是建立分析方法的关键.在粉葛的薄层鉴别中,笔者首先选用甲醇冷浸^[3]提取方法,发现分离效果不好,考察了甲醇、乙醇、乙酸乙酯、水等不同提取溶剂,超声、回流、萃取等提取方法^[2,5-7],结果发现纯水超声 ...

2010

... 取清口颗粒24 g(无糖清口颗粒12 g),置于具塞锥形瓶中,加石油醚(60~90 ℃)30 mL,回流30 min,滤过,残渣加热水10 mL置于60 ℃水浴锅上溶解,离心,上清液水浴蒸干,残渣加甲醇1 mL使溶解,作为供试品溶液^[3].另取桑叶对照药材2 g与缺桑叶阴性制剂,同法制成对照药材溶液与阴性样品溶液.照薄层色谱法实验,吸取上述溶液各10 μL,分别点于同一硅胶G薄层板上,以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(5∶2∶1)的上层溶液为展开剂,展开,取出,晾干,置于紫外灯(365 nm)下检视.供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点,且阴性样品溶液无干扰,见图3. ...

... 取清口颗粒12 g(无糖清口颗粒6 g),置具塞锥形瓶中,加水35 mL.加热煮沸15 min,放冷,离心,上清液用乙酸乙酯15 mL振摇提取,提取液浓缩至1 mL,作为供试品溶液^[3].另取枸杞子对照药材2 g与缺枸杞子阴性制剂,同法制成对照药材溶液与阴性样品溶液.照薄层色谱法实验,吸取上述溶液各5 μL,分别点于同一硅胶G薄层板上,以乙酸乙酯-三氯甲烷-甲酸(3∶2∶1)为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外灯(365 nm)下检视.供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点,且阴性样品溶液无干扰,见图4. ...

更年灵胶囊中女贞子的薄层鉴别

2005

... 取清口颗粒40 g(无糖清口颗粒20 g),研细,置于具塞锥形瓶,加入甲醇45 mL,加热回流30 min,滤过,滤液蒸干,残渣加无水乙醇-三氯甲烷(3∶2)混合液1 mL使溶解,作为供试品溶液^[4].另取缺女贞子阴性制剂同法制成阴性样品溶液.再取齐墩果酸对照品,加乙醇制成每毫升含1 mg的溶液,作为对照品溶液.照薄层色谱法实验,吸取上述溶液各10 μL,分别点于同一硅胶G薄层板上,以环己烷-丙酮-乙酸乙酯(5∶2∶1)为展开剂,展开,取出,晾干,喷以10%硫酸乙醇溶液,加热至斑点显色清晰.供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点,且阴性样品溶液无干扰,见图5. ...

胃肠康胶囊质量标准研究

2010

复方感冒清热颗粒的鉴别及含量测定

2012

尿畅舒胶囊质量标准研究

2008