超高效液相色谱-质谱联用法测定不同粒径活血散透皮吸收液中4种成分含量

杨炳火¹^,, 周芙琼², 朱维娜², 李文¹, 赵颖¹^,

南京市中医院1.药学部

2.中心实验室,南京 210001

YANG Binghuo¹^,, ZHOU Fuqiong², ZHU Weina², LI Wen¹, ZHAO Ying¹^,

1.Department of Pharmacy

2. Central Laboratory, Nanjing Hospital of Traditional Chinese Medicine , Nanjing 210001,China

赵颖(1984-),女,江苏南京人,主管中药师,执业中药师,硕士,研究方向:医院制剂工艺与质量标准。电话:025-52276123, E-mail:86371797@qq.com。

作者简介杨炳火(1966 -),男,江苏南京人,副主任中药师,学士,研究方向:医院制剂工艺与质量标准。电话:025-52276129,E-mail:86371797@qq.com 。

基金资助: 南京市医学科技发展项目(YKK14141)

中图分类号: R286 文献标识码: B 文章编号: 1004-0781(2017)09-1033-05

摘要:

目的比较粒径分别为0.150,0.075,0.048,0.038 mm的活血散透皮吸收前后的大黄素、黄柏碱、小檗碱、药根碱的含量,确定活血散的最佳粒径。方法采用超高效液相-质谱联用技术,对不同粒径活血散透皮吸收液24 h内大黄素、黄柏碱、小檗碱、药根碱的含量进行测定,比较各有效成分的含量,确定活血散的最佳粒径。结果粒径0.075 mm的活血散各有效成分含量较高,透皮吸收后各有效成分含量也较高。结论活血散以粒径0.075 mm的散剂最佳。

关键词: 活血散 ; 大黄素 ; 黄柏碱 ; 小檗碱 ; 药根碱 ; 超高效液相-色谱质谱联用 ; 透皮吸收

Abstract:

Objective To optimize the particle size of Huoxue powder by contents comparison of emodin, phellodendrine, berberine and jatrorrhizine before and after permeabilized skin absorption of Huoxue powder in different particle size of 0.150,0.075,0.048,0.038 mm. Methods The contents of emodin, phellodendrine, berberine and jatrorrhizine in transparent absorbent fluid of Huoxue power in different particle size within 24 hours were measured by ultra performance liquid chromatography tandem mass spectrometry, and optimize its particle size by contents comparison of the effective components. Results The contents of the active components in Huoxue power with the particle size of 0.075 mm were high before and after percutaneous absorption. Conclusion Particle size of 0.075 mm is best for Huoxue powder.

Key words: powder ; Phellodendrine ; Berberine ; Jatrorrhizine ; Ultra performance liquid chromatography tandem mass spectrometry ; Percutaneous absorption ; Emodin

活血散为我院的医院制剂,在临床治疗中已经使用多年,其中以骨伤科应用居多,该方由虎杖、黄柏、刘寄奴、地肤子、半枝莲、生南星、地鳖虫等7味药组成,功效为活血化瘀,消肿止痛。用于骨折、骨裂、软组织挫伤等跌打损伤诸症。该制剂深受广大患者的喜爱,疗效显著,安全无毒副作用。但是该制剂的剂型为散剂,应用起来比较麻烦,需要将活血散包扎于患处,给患者行动带来了不便,本研究旨在将传统剂型的活血散加工为应用方便、性质稳定的新剂型。

超微粉碎技术是从20世纪70年代逐渐发展起来的并成为各国研究重点的一门新技术。能把原材料加工成微米级甚至纳米级的微粉,它是粉体工程中的一项重要内容,包括对粉体原料的超微粉碎、高精度的分级和表面活性改变等内容。我国对粉体技术也非常重视,在国家“十五”医药经济发展规划中,将超细粉体技术列为“科技兴药”战略的内容之一,以发展传统的粉碎技术,大力推进中药行业的技术进步。目前超微技术在我国中药制药工业中的应用逐步开拓,应用前景广阔,已成为近年来中药界的研究热点。

目前临床在用的散剂粒径为0.150 mm(100目),疗效确切、安全无毒副作用,但使用复杂,要将散剂用适量饴糖拌匀后敷在患处,笔者前期对不同粒径制剂的显微鉴别和含量进行了相关研究,发现散剂粒径>0.075 mm,其显微特征逐渐减少,含量也存在差异,因此笔者进一步采用超高效液相-质谱联用技术对活血散不同粒径透皮吸收液中的大黄素、黄柏碱、小檗碱、药根碱浓度进行相关研究^[1-3],目的为优选出最佳粒径的活血散,用于新剂型巴布制剂的研究。

1 动物、仪器与试药

1.1 实验动物

健康 Wistar大鼠,雌雄各半,购自浙江省实验动物中心,实验动物生产许可证号:SCXK(浙) 20140001;动物上岗证编号:2132754。

1.2 仪器

Agilent 1290Infinity超高压液相色谱仪(安捷伦科技有限公司);质谱仪(安捷伦 G6460);ZORBAX SB-C₁₈柱( Rapid Resolution HT 2.1 mm×50 mm,1.8 μm);微量分析天平(瑞士梅特勒MS205DU,感量:0.01 mg);台式常温微量离心机(美国贝克曼 Microfuge16);超纯水系统(美国 thermo LabTower);超速多功能粉碎机( YB-1000A型)。

1.3 试药

大黄素(批号:110756-201512)、黄柏碱(批号:111895-201303)、小檗碱(批号:110713-201212)、药根碱(批号:111575-201302)均购自中国食品药品检定研究院;甲醇为色谱纯,其余试剂均为分析纯;刘寄奴、地肤子、半枝莲、虎杖、生南星、黄柏、地鳖虫饮片(安徽亳州永刚饮片厂有限公司,经南京市中医院李文主任中药师鉴定符合要求)。

2 方法与结果

2.1 不同粒度活血散的制备

将活血散各味药分别采用打粉机进行打粉,并分别过孔径0.150,0.075,0.048,0.038 mm的筛,按处方剂量称取各味药材,用研钵进行研磨,直至充分混匀为止,得粒径0.150,0.075,0.048,0.038 mm的活血散粉,用适量的饴糖将所得活血散粉拌匀,以备用。

2.2 透皮吸收实验

2.2.1 实验皮肤的选择及处理取体质量约200 g的雄性SD大鼠(符合SPF级),处死,用刀刮去腹部皮肤上的毛,剥离腹部皮肤。将剥离下来的皮肤平铺于玻璃板上,角质层向下,用单背刀片小心剔除皮下脂肪组织、血管及粘连物等,然后用0.9%氯化钠溶液反复冲洗干净,剪成适当的大小,并检查皮肤的完整性,最后置于密封袋中,加入适量的0.9%氯化钠溶液,放入冰箱中(-20 ℃)冷冻保存,备用。每次实验前,仔细检查鼠皮的完整性,不得有任何破损。

2.2.2 透皮实验方法将大鼠皮肤自然固定在改良的Franz扩散池上,有效扩散面积为3.14 cm²,接受室体积为7 mL,使皮肤表面面向供药室,皮肤里层与接受液刚好接触。供药室中将含药散剂与皮肤完全接触,接受液为脱气并37 ℃预热的20%乙醇0.9%氯化钠溶液。

将新鲜制备好的离体鼠皮从0.9%氯化钠溶液中取出,固定于扩散池上,使皮肤角质层面向上,将供试样品(0.50±0.03) g均匀涂布于鼠皮上(注意排除气泡),接受室水浴为37 ℃,以500 r·min^-1的速度磁力搅拌,分别于1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,11,24 h取出接受液0.5 mL,同时立即补充等体积预温37 ℃的接受液。所取样品加入甲醇0.5 mL,再用孔径0.22 μm微孔滤膜滤过,取续滤液5 μL进样测定含量,并计算药物在一定时间内的单位面积累积渗透量。药物单位面积累积渗透量M计算公式如下:

其中i和n为取样的次数,C_n为第n次取样时药物的浓度,C_i为第i次取样时接受液中的浓度;V为接受室的总体积,V₀为每次取样的体积,A为有效扩散面积^[4-9]。

2.3 含量测定

2.3.1 药材溶液配制称取用饴糖拌过的粒径0.150,0.075,0.048,0.038 mm的活血散各0.5 g,置10 mL量瓶中,用70%甲醇定容至刻度。

2.3.2 透皮溶液配制透皮溶液0.5 mL,加甲醇0.5 mL后涡旋,用孔径0.22 μm微孔滤膜滤过。

2.3.3 对照品溶液的配制称取黄柏碱、药根碱、小檗碱、大黄素适量,加甲醇配制成浓度分别为317.07,478.05,329.27,23.90 μg·mL^-1的对照品溶液。

2.3.4 色谱条件色谱柱:Aglient ZORBAX Eclipse Plus C₁₈(2.1 mm×50 mm,1.8 μm);柱温30 ℃;流速0.4 mL·min^-1;进样量5 μL;流动相:甲醇-0.1%甲酸溶液=80:20。

2.3.5 质谱条件采用电喷雾离子源(ESI),干燥气温度设定为350 ℃,干燥气流量为10 L·min^-1,毛细管电压为4 000 V(+),3 500 V(-)。选择正负离子扫描方式,多反应检测模式(MRM)^[10-14]。相关参数见表1。

成分	母离子	子离子	裂解电压/ V	碰撞能量/ (×10^-19 J)	极性
黄柏碱	342.2	192.1	175	40.0	+
药根碱	338.2	322.0	150	46.4	+
小檗碱	336.1	292.0	140	52.8	+
大黄素	269.0	225.0	150	33.6	-

表1 质谱选择通道及相关参数

Tab.1 Channel and related parameters of mass spectrometry

2.3.6 专属性实验取上述对照品溶液、药材溶液、透皮溶液,按照上述色谱条件,进样5 μL,测定,结果表明,在黄柏碱、药根碱、小檗碱、大黄素色谱峰处无干扰。

2.3.7 流动相的选择选用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂色谱柱,分别采用不同体系和比例的流动相进行色谱分离,甲醇-0.1%甲酸溶液(79:21)、甲醇-0.1%甲酸溶液(80:20)以及甲醇-0.1%甲酸溶液(81:19),结果表明以甲醇-0.1%甲酸溶液(80:20)为流动相分离效果最佳。

2.4 结果

活血散中大黄素、黄柏碱、小檗碱、药根碱的含量见表2,3。

表2 不同粒径活血散中大黄素、黄柏碱、小檗碱、药根碱的含量
Tab.2 Content of emodin,phellodendrine,berberine and jatrorrhizine in Huoxue powder with different particle size n=12

粒径/ mm	大黄素			黄柏碱		小檗碱			药根碱
粒径/ mm	峰面积A		含量/ (ng·mL^-1)		峰面积A	含量/ (ng·mL^-1)	峰面积A	含量/ (ng·mL^-1)	峰面积A	含量/ (ng·mL^-1)
粗粉	1 749	78.91		226 822	36.50	658 344	63.98		195 301	88.92
0.150	1 695	76.50		221 700	35.68	687 189	66.78		184 276	83.90
0.075	2 654	119.78		178 456	28.72	698 244	67.86		101 051	46.01
0.048	2 534	114.36		167 765	27.00	519 906	50.53		56 597	25.77
0.038	4 896	220.95		162 833	26.20	553 497	53.79		58 053	26.43

表2 不同粒径活血散中大黄素、黄柏碱、小檗碱、药根碱的含量

Tab.2 Content of emodin,phellodendrine,berberine and jatrorrhizine in Huoxue powder with different particle size n=12

由表2可知,大黄素含量以粒径0.038 mm的活血散药粉最高,次高的为粒径0.075 mm的药粉;黄柏碱含量最高的为粗粉,粒径0.075,0.048,0.038 mm黄柏碱的含量比较接近;小檗碱的含量最高为粒径0.075 mm的药粉;药根碱含量最高的为粗粉。由此可知粒径0.075 mm的活血散、小檗碱含量最高,大黄素含量第2,黄柏碱和药根碱含量居中。

活血散中大黄素、黄柏碱、小檗碱、药根碱的透皮吸收浓度见图1~4。

图1 不同粒径活血散中大黄素透皮吸收浓度-时间曲线

Fig.1 Transdermal absorption concentration-time curve of emodin of Huoxue powder with different particle size

图2 不同粒径活血散中黄柏碱透皮吸收浓度-时间曲线

Fig.2 Transdermal absorption concentration-time curve of phellodendrine of Huoxue powder with different particle size

图3 不同粒径活血散中小檗碱透皮吸收浓度-时间曲线

Fig.3 Transdermal absorption concentration-time curve of berberine of Huoxue powder with different particle size

图4 不同粒径活血散中药根碱透皮吸收浓度-时间曲线

Fig.4 Transdermal absorptionconcentration-time curve of jatrorrhizine of Huoxue powder with different particle size

由表3结合图1~4可知,不同粒径的活血散经1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,11,24 h透皮吸收,以24 h透皮溶液中大黄素、黄柏碱、小檗碱、药根碱的浓度最高;比较24 h大黄素、黄柏碱、小檗碱、药根碱的透皮吸收后其含量,大黄素含量粒径0.038 mm>粒径0.075 mm≈粒径0.048 mm>粒径0.150 mm(粒径0.075,0.048 mm大黄素含量较接近);黄柏碱含量粒径0.150 mm>粒径0.075 mm≈粒径0.048 mm≈粒径0.038 mm(粒径0.075,0.048,0.038 mm黄柏碱含量较接近);小檗碱含量粒径0.075 mm>粒径0.038 mm≈粒径0.048 mm>粒径0.150 mm(粒径0.048,0.038 mm小檗碱含量较接近);药根碱含量粒径0.150 mm>粒径0.075 mm>粒径0.048 mm>粒径0.038 mm。粒径0.075 mm粉小檗碱含量最高,大黄素、黄柏碱、药根碱均排名第2,综合4种有效成分的含量,粒径0.075 mm 1次排名第1,3次排名第2,因此将活血散暂定以粒径0.075 mm粉透皮吸收4种成分含量最高。

表3 不同粒径活血散透皮吸收24 h大黄素、黄柏碱、小檗碱、药根碱的浓度
Tab.3 Concentration of emodin,berberine,phellodendrine and jatrorrhizine during 24 hours of transdermal absorption of Huoxue powder with different particle size ng·mL^-1

成分	活血散粒径/ mm	1 h	2 h	3 h	4 h	5 h	6 h	7 h	8 h	9 h	10 h	11 h	24 h
大黄素	0.150	0.00	0.00	9.92	0.00	0.00	7.15	15.59	14.15	0.00	18.89	31.95	30.00
	0.075	6.69	15.55	8.32	7.70	6.69	8.25	10.97	12.17	16.81	17.62	33.58	52.95
	0.048	0.00	0.00	0.00	0.00	0.00	0.00	6.04	6.93	10.49	12.74	13.78	51.66
	0.038	0.00	0.00	6.49	11.40	9.95	10.68	27.26	35.87	43.32	44.55	73.78	111.40
黄柏碱	0.150	0.38	0.63	0.84	0.98	0.82	0.84	0.90	0.98	0.70	0.81	0.89	1.40
	0.075	0.54	0.60	0.59	0.68	0.74	0.69	0.70	0.72	0.80	0.80	0.82	0.91
	0.048	0.68	0.71	0.65	0.68	0.67	0.78	0.79	0.72	0.74	0.78	0.82	0.85
	0.038	0.50	0.59	0.61	0.65	0.67	0.67	0.70	0.71	0.70	0.76	0.71	0.80
小檗碱	0.150	0.52	0.63	0.70	0.74	0.98	0.91	0.71	0.73	0.44	0.65	0.92	0.98
	0.075	0.21	0.38	0.25	0.22	0.31	0.27	0.25	0.22	0.21	0.16	0.19	2.22
	0.048	0.92	0.45	0.62	0.42	0.35	0.44	0.45	0.38	0.44	0.34	0.34	1.49
	0.038	0.20	0.23	0.28	0.28	0.23	0.30	0.34	0.40	0.41	0.37	0.30	1.62
药根碱	0.150	44.70	43.59	47.47	58.37	60.76	62.16	63.41	64.41	65.87	67.38	67.47	70.71
	0.075	3.60	4.19	14.73	18.41	12.90	24.17	17.81	18.96	20.73	22.73	24.90	27.52
	0.048	1.89	2.37	7.16	6.92	10.84	13.04	14.33	15.82	16.06	16.03	16.72	16.90
	0.038	0.15	0.16	1.62	1.53	1.90	4.01	0.26	4.08	6.25	7.76	8.12	10.97

表3 不同粒径活血散透皮吸收24 h大黄素、黄柏碱、小檗碱、药根碱的浓度

Tab.3 Concentration of emodin,berberine,phellodendrine and jatrorrhizine during 24 hours of transdermal absorption of Huoxue powder with different particle size ng·mL^-1

3 讨论

一般认为中药材超微粉粒径为0.001~0.075 mm,笔者主要考察粒径0.150,0.075,0.048,0.038 mm的活血散粉的显微鉴别特征^[15]。药物粒径对疗效有着一定的影响,前期的显微鉴别实验发现粒径微分越细,显微特征越不明显,并且本实验也得出不同粒径的活血散透皮吸收的浓度也不同,后期还将进一步优化最佳的粒径、最佳的药量、最佳的疗效。

实验过程中,笔者曾采用超高效液相色谱法对处方中的各有效成分进行含量测定,但由于有效成分经透皮吸收后含量过低,因此改用超高效液相色谱-质谱联用技术进行含量测定,该方法对于中药复方制剂这一复杂体系的分析,表现出高灵敏度、高选择性,分析速度快,并且不要求被测成分完全分离。

质谱分析中,对各被测成分的质谱参数进行了优化,结果显示,黄柏碱、小檗碱、药根碱在正离子模式下响应较好,而大黄素在负离子模式下的响应高于正离子模式,故确定采用正负离子同时检测。

The authors have declared that no competing interests exist.

参考文献

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[5]	李芸,闫治攀,魏舒畅,等.盐酸小檗碱、吴茱萸挥发油、大黄总蒽醌促进苦参碱透皮吸收的量效关系研究[J].中成药,2014,36(3):510-514. URL [本文引用:0]
[6]	汪宏,王维,张建华,等.他克莫司软膏的体外透皮吸收研究[J].华西药学杂志,2014,29(2):119-121. 目的研究他克莫司软膏对离体巴马香猪皮的透皮吸收情况,并比较他克莫司软膏的供试制剂与参比制剂的体外透皮渗透量和渗透速率.方法采用改良Franz扩散池法,用反相HPLC法定量测定接受室溶液中他克莫司浓度及皮内滞留药物.结果他克莫司经离体巴马香猪皮的透过率随时间的延长而增加;48 h内,他克莫司软膏的供试制剂与参比制剂经离体巴马香猪皮的累积透过量分别为22.87±1.31、21.61±2.26μg·cm-2,平均渗透速率分别为0.7669、0.7149 μg·cm-2·h-1.结论在透皮吸收研究中,他克莫司软膏的供试制剂与参比制剂的透皮渗透程度和渗透速率差异无统计学意义. DOI:10.13375/j.cnki.wcjps.2014.02.004 URL [本文引用:0]
[7]	肖学成,熊驰,彭秀菊,等.HPLC测定他克莫司软膏体外透皮吸收[J].中国现代应用药学,2014,31(7):839-843. 目的建立规格为0.03%的他克莫司软膏体外透皮接收液中药物的HPLC测定方法,研究0.03%他克莫司软膏的体外透皮量。方法采用Diamonsil C18色谱柱（250 mm×4.6 mm,5μm）;流动相：乙腈-水-磷酸（700∶300∶1）;流速：1.0 mL.min 1;检测波长：215 nm。体外透皮实验采用改良的Franz直立式扩散池,透皮屏障采用实验用离体乳猪皮。将自制软膏与市售软膏的透皮结果进行对比分析,分别在设定的不同时间点取样测定透皮接收液中他克莫司的浓度,计算累积透皮量。结果他克莫司的标准曲线方程为A=16 310.263C＋3 629.783（r=0.999 97）,线性范围为2.088-20.88μg.mL 1,平均回收率为99.10%。累积透皮量与时间呈良好的线性关系,自制软膏与市售软膏的透皮结果无显著性差异。结论该检测方法操作简便,快速准确,是考察他克莫司软膏体外透皮性能的理想方法。 URL [本文引用:0]
[8]	梁学政,奉建芳,陈惠红,等.双柏凝胶剂中大黄素体外透皮吸收的实验研究[J].时珍国医国药,2010,21(1):160-161. URL [本文引用:0]
[9]	李玲慧. 双黄巴布剂的研制与体外透皮吸收研究[D].广州:广州中医药大学,2010:15. [本文引用:1]
[10]	张倩,蔡丽芬,钟国跃,等.RP-HPLC法同时测定关黄柏中小檗碱、药根碱、巴马汀及黄柏酮含量的方法学研究[J].中国中药杂志,2010,35(16):2061-2064. [本文引用:1]
[11]	匡艳辉,朱晶晶,王智民,等.一测多评法测定黄连中小檗碱、巴马汀、黄连碱、表小檗碱、药根碱含量[J].中国药学杂志,2009,44(5):390-394. OBJECTIVE To establish a new method of quality evaluation and validate its feasibilities by the simultaneous quantitative assay of five alkaloids in rhizome of Coptis chinensis.METHODS The new quality evaluation method,quantitative analysis of multi-components by single marker(QAMS),was established and validated with rhizoma of Coptis chinensis.Five main alkaloids,berberine,palmatine,coptisine,epiberberine and jatrorrhizine,were selected as analytes to evaluate the quality.Their contents in 28 batches of samples,collected from different areas,were determined by both external standard method and QAMS.The method was evaluated by comparison of the quantitative results between external standard method and QAMS.RESULTS No significant differences were found in the quantitative results of five alkaloids in 28 batches of Coptis chinensis determined by external standard method and QAMS(RSDCoptis chinensis by QAMS. URL [本文引用:0]
[12]	董静,王弘,万乐人,等.高效液相色谱/电喷雾-离子阱-飞行时间质谱分析鉴定中药虎杖中的主要化学成分[J].色谱,2009,27(4):425-430. 建立了快速、准确鉴别中药虎杖中化学成分的液相色谱-质谱法。采用高效液相色谱/电喷雾-离子阱-飞行时间质谱（HPLC/ESI-IT-TOFMS）对蒽醌类以及羟基二苯乙烯类对照品,包括大黄素、大黄酚、大黄素甲醚、大黄酸、芦荟大黄素和虎杖苷进行了分析,总结其多级裂解规律。建立了虎杖甲醇提取物的液相色谱分离条件及质谱检测条件,根据负离子模式下获得的各组分多级质谱数据,对比对照品碎裂特征并参考文献,对主要色谱峰进行指认,共鉴别了10个化合物,包括白藜芦醇-4′-O-葡萄糖苷、虎杖苷、大黄素-8-O-葡萄糖苷、白藜芦醇、决明松-8-O-葡萄糖苷、大黄素-1-O-葡萄糖苷、决明松-8-O-（6′-乙酰基）葡萄糖苷、大黄素甲醚-8-O-葡萄糖苷、大黄素甲醚-8-O-（6′-乙酰基）葡萄糖苷和大黄素,其中决明松-8-O-（6′-乙酰基）葡萄糖苷和大黄素甲醚-8-O-（6′-乙酰基）葡萄糖苷为虎杖中新发现的成分。研究结果表明,在中药化学成分研究工作中,采用电喷雾-离子阱-飞行时间质谱可提高中药化学成分的分析效率并有利于新化合物的发现和鉴别。 DOI:10.3321/j.issn:1000-8713.2009.04.009 URL [本文引用:0]
[13]	蒋海强,容蓉,吕青涛.大黄化学成分的液相色谱-质谱联用鉴别[J].时珍国医国药,2011,22(7):1705-1706. 目的建立快速、准确鉴别大黄化学成分的液相色谱-质谱方法.方法采用HPLC-MS技术,对大黄的主要化学成分进行分离、鉴别、结构分析.结果根据负离子模式下获得各色谱峰质谱数据,参照文献,对主要色谱峰进行指认,共鉴别了25个化合物,其主要化学成分是多酚、蒽醌及其苷类化合物.结论 HPLC-MS可提高中药化学成分的分析效率,有利于化合物结构鉴别,可作为中药大黄化学成分的鉴定方法. DOI:10.3969/j.issn.1008-0805.2011.07.074 URL [本文引用:0]
[14]	胡梦迪,苏迪,范晓苏,等.月桂酰基苹果酸酯胶束电动色谱-质谱法同时测定牛黄上清片中5种生物碱[J].色谱,2012,30(12):1276-1281. 建立了基于月桂酰基苹果酸酯的胶束电动色谱-质谱法同时分离测定牛黄上清片中黄连碱、小檗碱、药根碱、黄柏碱以及川芎嗪5种有效成分含量的新方法。以7.5 mmol/L月桂酰基苹果酸酯-15 mmol/L氨水-50 mmol/L醋酸铵(含12.5%的乙腈,pH=7.0)为电泳介质,未涂层弹性石英毛细管(88 cm×50μm)为分离通道,50%异丙醇水溶液(含3 mmol/L乙酸)为鞘液,在25 kV的运行电压下,各组分可以在18 min内得到基线分离。各组分的浓度与其峰面积呈现良好的线性关系,迁移时间和峰面积的相对标准偏差均小于5%,样品中5种生物碱成分的样品加标回收率在96.0%～105%之间。该法简便、快速、准确、重现性好,可用于牛黄上清片中这5种有效成分含量的同时测定。 DOI:10.3724/SP.J.1123.2012.09044 URL [本文引用:1]
[15]	邓雯. 三七、西洋参两味中药材超微粉的制备工艺与质量评价研究 [D].广州:广州中医药大学,2008:20-21. [本文引用:1]

超高效液相色谱-串联质谱同时测定首乌藤中13种成分

2016

... 目前临床在用的散剂粒径为0.150 mm(100目),疗效确切、安全无毒副作用,但使用复杂,要将散剂用适量饴糖拌匀后敷在患处,笔者前期对不同粒径制剂的显微鉴别和含量进行了相关研究,发现散剂粒径>0.075 mm,其显微特征逐渐减少,含量也存在差异,因此笔者进一步采用超高效液相-质谱联用技术对活血散不同粒径透皮吸收液中的大黄素、黄柏碱、小檗碱、药根碱浓度进行相关研究^[1-3],目的为优选出最佳粒径的活血散,用于新剂型巴布制剂的研究. ...

高效液相色谱 -串联质谱法同时测定减肥保健食品中酚酞和大黄素的方法研究

2010

LC-MS/MS同时测定一清胶囊 9种成分的含量

2013

金黄膏中小檗碱体外透皮吸收研究

2014

... 其中i和n为取样的次数,C_n为第n次取样时药物的浓度,C_i为第i次取样时接受液中的浓度;V为接受室的总体积,V₀为每次取样的体积,A为有效扩散面积^[4-9]. ...

盐酸小檗碱、吴茱萸挥发油、大黄总蒽醌促进苦参碱透皮吸收的量效关系研究

2014

他克莫司软膏的体外透皮吸收研究

2014

HPLC测定他克莫司软膏体外透皮吸收

2014

双柏凝胶剂中大黄素体外透皮吸收的实验研究

2010

双黄巴布剂的研制与体外透皮吸收研究

2010

RP-HPLC法同时测定关黄柏中小檗碱、药根碱、巴马汀及黄柏酮含量的方法学研究

2010

... 2.3.5 质谱条件采用电喷雾离子源(ESI),干燥气温度设定为350 ℃,干燥气流量为10 L·min^-1,毛细管电压为4 000 V(+),3 500 V(-).选择正负离子扫描方式,多反应检测模式(MRM)^[10-14].相关参数见表1. ...

一测多评法测定黄连中小檗碱、巴马汀、黄连碱、表小檗碱、药根碱含量

2009

高效液相色谱/电喷雾-离子阱-飞行时间质谱分析鉴定中药虎杖中的主要化学成分

2009

大黄化学成分的液相色谱-质谱联用鉴别

2011

月桂酰基苹果酸酯胶束电动色谱-质谱法同时测定牛黄上清片中5种生物碱

2012

三七、西洋参两味中药材超微粉的制备工艺与质量评价研究 [D]

2008

... 一般认为中药材超微粉粒径为0.001~0.075 mm,笔者主要考察粒径0.150,0.075,0.048,0.038 mm的活血散粉的显微鉴别特征^[15]. 药物粒径对疗效有着一定的影响,前期的显微鉴别实验发现粒径微分越细,显微特征越不明显,并且本实验也得出不同粒径的活血散透皮吸收的浓度也不同,后期还将进一步优化最佳的粒径、最佳的药量、最佳的疗效. ...