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第七届湖北十大名刊提名奖  
医药导报, 2019, 38(7): 927-932
doi: 10.3870/j.issn.1004-0781.2019.07.020
白芥子涂方乳化型膏贴剂的制备工艺
Preparation Process of White Mustard Seed Varnish Emulsified Emplastrum
刘新国, 黄文涛

摘要:

目的 采用正交实验设计,优选白芥子涂方药材提取工艺和乳化型膏贴基质配比。方法 分别以白芥子中芥子碱硫氰酸盐、甘遂中大戟二烯醇提取量,以及延胡素中延胡索乙素、细辛中细辛酯素提取量作为考察指标,选择L9(34)正交实验,考察各因素对乙醇回流提取工艺和超临界二氧化碳(CO2)萃取工艺的影响。选用石蜡、单甘酯、凡士林、甘油为乳化型膏贴基质配料,选择黏性、软硬度、熔化性、均匀度为考察指标进行综合评分,采用L9(34)正交实验优选基质配制比例。结果 回流提取过程中,乙醇浓度对白芥子和甘遂提取均有显著影响(P<0.05),乙醇用量显著影响甘遂中大戟二烯醇浸出(P<0.05),二者合并提取优选工艺条件为加13倍量60%乙醇,回流提取1次,每次1 h。超临界CO2萃取过程中,仅萃取釜压力对延胡索和细辛的提取效果产生显著影响(P<0.05)。确定优选工艺条件为:萃取压力25 MPa,萃取温度40 ℃,95%乙醇为夹带剂,用量为药材用量3倍。基质成型过程,石蜡与凡士林用量是影响基质成型的关键因素(P<0.05),石蜡、单甘酯、凡士林和甘油的优选配比为2:4:2:1。结论 采用正交实验方法确定了白芥子涂方药材优选提取条件,以及乳化型膏贴基质配比。按优化处方制备的白芥子涂方乳化型膏贴剂具有载药量大、乳化性能好、促进药物透皮释放的特点。

关键词: 白芥子涂方 ; 乳化型膏 ; 回流萃取 ; 超临界二氧化碳萃取 ; 正交实验

Abstract:

Objective To optimize the extraction process of white mustard seed varnish and it's matrix ratio by orthogonal design. Methods The extraction process was optimized by L9(34)orthogonal design with the yield of extraction of sinapine thiocyanate,euphadienol,tetrahydropalmatine, and asarinin.The variance analysis method was used to find out the key factors on ethanol reflux extraction and supercritical CO2 extraction process.Paste substrate consists of paraffin, monoglyceride,vaseline,glycerin and so on.The research selected viscosity, hardness,melting property and evenness as indicators to evaluate the formulations.And the L9 (34) orthogonal experiment was used to select the optimal formulation. Results Ethanol concentration significantly affected the extraction of white mustard and Euphorbia kansui (P<0.05),and the amount of solvent only significantly affected the dissolution of euphadienol in Euphorbia kansui (P<0.05).The optimal extraction conditions for the combined extraction were as follows: adding 60% ethanol 13 times the amount of extractand reflux for 1 hour each time.During the supercritical CO2 extraction process extraction of axe pressure had a significant effect for the extraction efficiency of asarinin and corydalis only (P<0.05).The optimum extraction conditions are as follows: extraction pressure 25 MPa,extraction temperature 40 ℃, 95% ethanol as entrainer,which is 3 times the amount of medicinal materials.The key factors affecting the matrix molding paraffin and vaseline is the (P < 0.05),and the optimum ratio of paraffin,monoglyceride,vaseline and glycerin was 2:4:2:1. Conclusion The optimum extraction conditions and the proportion of emulsion paste substrate are determined by orthogonal experiment in this study.The emulsified patch prepared according to the optimized formula has prominent characteristics of high drug loading, good emulsifying property and promoting the transdermal release of drugs.

Key words: White mustard ; Emulsified plaster ; Reflux extraction ; Supercritical CO extraction ; Orthogonal experiment

白芥子涂方用于防治肺系疾病,始见于清代张璐编撰的《张氏医通》,该方在防治哮喘方面有较好疗效,目前被各大医院广泛采用[1]。传统白芥子涂方以药材粉末入药,不仅成分含量不可控,且由于药材本身质量差异以及患者皮肤耐受程度差别,使得贴敷时间一般只能维持2~6 h[2,3],有悖于经皮给药制剂质量可控、缓释长效的要求。目前,笔者尚未见基于该方开发的现代膏贴剂型。笔者在系统比较软膏剂、黑膏药等膏贴剂型特点基础上,配制具有乳化性质的硬膏剂基质。该基质与其他外用膏贴基质相比,在载药量、乳化性能、药物兼容性、透皮能力、稳定性方面均具有明显优势。笔者在研究中首先采用乙醇回流提取与现代超临界二氧化碳(CO2)萃取技术实现药材有效成分的浓度富集与纯化,再结合乳化型膏贴透皮剂型,将此传统经典方药开发成治疗哮喘的新型中药膏贴剂型,现报道如下。

1 仪器与试药
1.1 仪器

SPD-10A型二元泵高效液相色谱仪,配Essentia SPD-16型紫外检测器(岛津公司); ME215s型分析天平(Sartorious公司,感量:0.01 mg);HS6510D型超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)。

1.2 试药

芥子碱硫氰酸盐对照品(批号:111702-201303,含量:98.3%)、大戟二烯醇对照品(批号:111866-201302,含量:99.9%)、细辛酯素对照品(批号:111889-201203,含量:100%)、延胡索乙素对照品(批号:0726-200208,含量:99.8%)均购自中国食品药品检定研究院。乙腈为色谱纯(美国Tedia试剂公司生产,批号:16095012)。水为纯净水,其他试剂均为市售分析纯。

2 方法与结果
2.1 色谱条件

2.1.1 芥子碱硫氰酸盐含量测定色谱条件 色谱柱:Zorbax Extend C18柱(250 mm×4.6 mm,5 μm);流动相:乙腈-0.08 mol·L-1磷酸二氢钾(10:90);流速:1.0 mL·min-1;检测波长:326 nm;进样量:10 μL;柱温:30 ℃,理论塔板数按芥子碱峰计算应不低于3000。

2.1.2 大戟二烯醇含量测定色谱条件 色谱柱:Zorbax Extend C18柱(250 mm×4.6 mm,5 μm);流动相:乙腈-水(95:5);流速:1.0 mL·min-1;检测波长:210 nm;进样量:10 μL;柱温:30 ℃,理论板数按大戟二烯醇峰计算应不低于6000。

2.1.3 细辛脂素测定色谱条件 色谱柱:Zorbax Extend C18柱(250 mm×4.6 mm,5 μm);流动相:乙腈-0.2%醋酸溶液(48:52);流速:1.0 mL·min-1;检测波长:287 nm;进样量:10 μL;柱温:室温,理论板数按细辛脂素峰计算应不低于3000[4]

2.1.4 延胡索乙素测定色谱条件 色谱柱:Zorbax Extend C18柱(250 mm×4.6 mm,5 μm);流动相:乙腈-0.1%磷酸溶液(40:60),用三乙胺调pH值6.5;流速:1.0 mL·min-1;检测波长:280 nm;进样量:10 μL;柱温:30 ℃,理论板数按延胡索乙素峰计算应不低于3000[5]

2.2 溶液的配制

2.2.1 对照品贮备溶液的制备 精密称取经五氧化二磷干燥至恒重的芥子碱硫氰酸盐对照品、大戟二烯醇对照品各适量,分别置于不同量瓶,加甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,分别制成芥子碱硫氰酸盐496 μg·mL-1和大戟二烯醇163 μg·mL-1对照品贮备溶液。

2.2.2 供试品溶液的制备 精密量取各回流提取样品1 mL,甲醇定容至5 mL量瓶,摇匀,以孔径0.45 μm微孔滤膜滤过,取续滤液,即得。

2.2.3 阴性对照溶液的制备 取除受试药材以外的药材,按回流提取方法操作,精密量取提取液样品1 mL,甲醇定容至5 mL量瓶,摇匀,以孔径0.45 μm微孔滤膜滤过,取续滤液,即为阴性对照溶液。

2.3 方法学考察

2.3.1 方法专属性考察 吸取供试品溶液、阴性对照溶液、芥子碱硫氰酸盐和大戟二烯醇对照品溶液各10 μL,按“2.1”项色谱条件进行液相分析,见图1。

图1 回流提取样品的高效液相色谱图
A.芥子碱硫氰酸盐对照品溶液;B.供试品溶液;C.缺芥子的阴性对照品溶液;D.大戟二烯醇对照品溶液;E.供试品溶液;F.缺甘遂的阴性对照品溶液;1.芥子碱硫氰酸盐;2.大戟二烯醇

Fig.1 High performance liquid chromatograph for refluxing samples
A.sinapine thiocyanate;B.sample solution; C.mustard negative control; D.euphadienol; E.sample solution;F.euphorbia negative control;1.sinapine thiocyanate control;2.euphadienol

2.3.2 标准曲线的绘制 精密量取上述对照品贮备溶液100,200,400,1000,2000 μL,加甲醇稀释定容至10 mL,分别精密吸取10 μL注入液相色谱仪,按照上述色谱条件平行进样测定3次。以芥子碱硫氰酸盐、大戟二烯醇进样量(ng)为横坐标(X),峰面积平均值为纵坐标(Y)进行线性回归,得回归方程,结果见表1。

表1 芥子碱硫氰酸盐与大戟二烯醇线性关系考察
Tab.1 Linear correlation of sinapine thiocyanate and euphadienol
成分 线性方程 r 线性范围/ng
芥子碱硫氰酸盐 Y=7534.6X-25 988 0.999 8 49.2~992
大戟二烯醇 Y=37 652X-22 397 0.999 9 16.3~326

表1 芥子碱硫氰酸盐与大戟二烯醇线性关系考察

Tab.1 Linear correlation of sinapine thiocyanate and euphadienol

2.3.3 精密度实验 精密吸取同一供试品溶液10 μL,按“2.1”项色谱条件连续进样5次,测得芥子碱硫氰酸盐和大戟二烯醇峰面积的RSD分别为0.28%和0.93%,表明仪器精密度良好。

2.3.4 稳定性实验 精密吸取同一供试品溶液10 μL,分别于0,2,4,6,12 h进样测定。经计算,芥子碱硫氰酸盐和大戟二烯醇峰面积的RSD分别为1.12%和1.57%,表明供试品溶液在12 h内基本保持稳定。

2.3.5 回收率实验 精密称取9份已知含量的回流提取液200 μL,分别向其中加入一定量芥子碱硫氰酸盐或大戟二烯醇对照品,用流动相加至5 mL,混匀,精密吸取10 μL注入液相色谱仪,测定峰面积。利用标准曲线计算含量,以3次平行进样的平均含量计算加样回收率,结果芥子碱硫氰酸盐平均回收率97.06%,RSD=2.40%,大戟二烯醇平均回收费率96.66%,RSD=2.31%。见表2。

表2 芥子碱硫氰酸盐与大戟二烯醇回收率实验结果
Tab.2 Experimental results on the recovery of sinapine thiocyanate and euphadienol
成分 样品量 加入量 测得量 回收率/
%
μg
芥子碱硫氰酸盐 97.8 74.4 166.3 92.07
97.8 74.4 168.7 95.30
97.8 74.4 168.1 94.49
97.8 99.2 195.4 98.39
97.8 99.2 194.4 97.38
97.8 99.2 193.6 96.57
97.8 124.0 220.2 98.71
97.8 124.0 219.1 97.82
97.8 124.0 220.8 99.19
大戟二烯醇 24.9 16.3 40.3 94.48
24.9 16.3 40.7 96.93
24.9 16.3 40.9 98.16
24.9 24.5 47.6 92.65
24.9 24.5 48.6 96.73
24.9 24.5 49.2 99.18
24.9 32.6 57.1 98.77
24.9 32.6 57.3 99.39
24.9 32.6 56.6 97.24

表2 芥子碱硫氰酸盐与大戟二烯醇回收率实验结果

Tab.2 Experimental results on the recovery of sinapine thiocyanate and euphadienol

2.4 白芥子、甘遂回流提取工艺的正交实验设计

白芥子、甘遂药材乙醇回流提取工艺,以白芥子有效成分芥子碱硫氰酸盐和甘遂有效成分大戟二烯醇的提取量作为考察指标,采用《中华人民共和国药典》2015年版芥子和甘遂药材品种项下高效液相色谱(HPLC)法测定相关指标成分含量[5]。以乙醇浓度、乙醇用量、提取时间、提取次数为影响因素,选用L9(34)表进行正交实验,优选回流提取工艺条件。正交实验因素水平设计见表3。

表3 回流提取工艺正交实验因素水平
Tab.3 Factors and levels of orthogonal experiment for reflux extraction process
水平 乙醇浓度
(A)/%
提取时间
(B)/min
溶剂用量
(C)/mV
提取次数
(D)
1 60 60 1:7 1
2 75 90 1:10 2
3 90 120 1:13 3

表3 回流提取工艺正交实验因素水平

Tab.3 Factors and levels of orthogonal experiment for reflux extraction process

2.5 细辛和延胡索超临界CO2萃取工艺正交实验设计

细辛和延胡索超临界CO2萃取工艺是以延胡索中延胡索乙素以及细辛中细辛酯素提取量为考察指标,采用《中华人民共和国药典》2015年版细辛和延胡索药材品种项下HPLC法测定相关指标成分含量[5]。以萃取压力、萃取温度、夹带剂用量、萃取时间为影响因素,选用L9(34)表进行正交实验,优选超临界CO2萃取工艺条件。正交实验因素水平设计见表4。

表4 超临界CO2萃取工艺正交实验因素水平表
Tab.4 Factors and levels of orthogonal experiment for supercritical CO2 extraction process
水平 萃取压力
(A)/MPa
萃取温度
(B)/℃
夹带剂用量
(C)/倍
萃取时间
(D)/min
1 15 40 1.5 60
2 25 50 3.0 90
3 35 60 4.5 120

表4 超临界CO2萃取工艺正交实验因素水平表

Tab.4 Factors and levels of orthogonal experiment for supercritical CO2 extraction process

2.6 乳化型膏贴基质配方的正交实验设计

成型工艺采用石蜡、单甘酯、凡士林、甘油为中药膏贴剂型基质配料,选择黏性、软硬度、熔化性、均匀度等为考察指标进行综合评分,采用L9(34)正交实验优选基质配制比例,正交实验因素水平设计见表5。

表5 基质配比正交实验设计表
Tab.5 Orthogonal design of matrix ratio g
水平 因素
石蜡
(A)
单甘酯
(B)
凡士林
(C)
甘油
(D)
1 2 2 1 1
2 4 4 2 2
3 6 8 3 3

表5 基质配比正交实验设计表

Tab.5 Orthogonal design of matrix ratio g

按膏贴基质配比正交实验设计表实验,将制成的药膏制成圆柱状,再切成圆片状,将药膏填充入背衬层的固定圆环中,使每张膏贴中填充药膏2 g,直径约3.6 cm,含生药材4 g。以下是正交实验基质评分的标准。①黏性。4分:适中,不粘手;2分:黏性偏强或偏差;0分:无黏性或粘手。②软硬度。4分:适中,易成形,易压成片状;2分:较易成形,但偏硬或偏软;0分:太硬或太软,不易成形。③均匀度(肉眼观察)。4分:颜色均匀一致;2分:比较均匀,但浸膏与基质混合略显不均匀;0分:浸膏与基质混合不均匀。④熔化性(45~50 ℃考察48 h)。4分:制成贴剂后,放置恒温45~50 ℃烘箱中观察48 h,基质不熔化,底衬垫上未见明显熔化痕迹<1 mm;2分:基质少量熔化,底衬垫上熔化痕迹1~2.5 mm;0分:基质熔化明显,底衬垫上熔化痕迹>2.5 mm。⑤载药量。4分:20%以上;3分:15~20%;2分:10~15%;1分:10%以下。

2.7 白芥子和甘遂回流提取的正交实验结果

表1设计方案分别进行回流提取,滤过,测定其中芥子碱硫氰酸盐和大戟二烯醇含量,正交实验结果见表6,各指标成分方差分析结果见表7,8。

表6 白芥子和甘遂乙醇回流提取正交实验结果
Tab.6 Orthogonal experiment results of ethanol reflux extraction of white mustard seed and euphorbia
序号 因素 芥子碱硫氰酸盐 大戟二烯醇
石蜡
(A)
单甘酯
(B)
凡士林
(C)
甘油
(D)
(μg·mL-1)
1 1 1 1 1 543.1 120.0
2 1 2 2 2 488.8 124.4
3 1 3 3 3 489.6 128.8
4 2 1 2 3 484.7 150.7
5 2 2 3 1 471.4 153.6
6 2 3 1 2 448.1 146.5
7 3 1 3 2 424.3 143.5
8 3 2 1 3 410.6 131.1
9 3 3 2 1 393.4 138.0
K1 1 521.48 1 452.03 1 401.72 1 407.86
K2 404.18 1 370.80 1 366.88 1 361.23
K3 1 228.23 1 331.05 1 385.28 1 384.79
R 293.25 120.98 34.85 46.63
K1 373.13 414.13 397.52 411.60
K2 450.77 409.12 413.10 414.32
K3 412.59 413.24 425.86 410.57
R 77.65 5.01 28.34 3.74

表6 白芥子和甘遂乙醇回流提取正交实验结果

Tab.6 Orthogonal experiment results of ethanol reflux extraction of white mustard seed and euphorbia

表7 白芥子乙醇回流提取方差分析结果
Tab.7 Results of variance analysis on ethanol reflux extraction of white mustard seed
误差来源 离差平方和 自由度 方差 F P
石蜡(A) 14 523.99 2.00 7 262.00 71.69 <0.05
单甘酯(B) 2 535.00 2.00 1 267.50 12.51 >0.05
凡士林(C) 202.60 2.00 101.30 1.00 >0.05
甘油(D) 362.34 2.00 181.17 1.79 >0.05

表7 白芥子乙醇回流提取方差分析结果

Tab.7 Results of variance analysis on ethanol reflux extraction of white mustard seed

F0.05(2,2)=19.00,F0.01(2,2)=99.00

表8 甘遂乙醇回流提取方差分析结果
Tab.8 Results of variance analysis on ethanol reflux extraction of euphorbia
误差来源 离差平方和 自由度 方差 F P
石蜡(A) 1 004.97 2.00 502.48 403.20 <0.01
单甘酯(B) 4.77 2.00 2.38 1.91 >0.05
凡士林(C) 134.27 2.00 67.14 53.87 <0.05
甘油(D) 2.49 2.00 1.25 1.00 >0.05

表8 甘遂乙醇回流提取方差分析结果

Tab.8 Results of variance analysis on ethanol reflux extraction of euphorbia

结果显示,仅乙醇浓度对白芥子和甘遂提取效果产生显著影响(P<0.05),高浓度乙醇不利于芥子碱溶出。而对于甘遂的提取而言,溶剂用量是影响结果的首要因素(P<0.05),适当提高乙醇浓度可以增加大戟二烯醇的溶出。如果考虑将两种药材进行合并提取,综合省时、经济方面的因素考虑,则应选择乙醇回流提取工艺条件为加13倍量60%乙醇,回流提取1次,每次1 h。

2.8 细辛和延胡索超临界CO2萃取正交实验结果

表2设计方案分别进行超临界CO2萃取,测定样品中细辛脂素和延胡索乙素含量,正交实验结果见表9,各指标成分方差分析结果分别见表10,11。

表9 细辛和延胡索超临界CO2萃取正交实验结果
Tab.9 Orthogonal experiment results of supercritical CO2 extraction process of asarum and corydalis
序号 因素 细辛脂素 延胡索乙素
石蜡
(A)
单甘酯
(B)
凡士林
(C)
甘油
(D)
(μg·mL-1)
1 1 1 1 1 50.0 40.1
2 1 2 2 2 41.8 41.5
3 1 3 3 3 39.2 42.6
4 2 1 2 3 76.2 57.9
5 2 2 3 1 68.5 53.8
6 2 3 1 2 66.1 52.1
7 3 1 3 2 60.4 43.2
8 3 2 1 3 63.1 50.2
9 3 3 2 1 62.6 47.7
K1 131.06 186.61 179.14 181.20
K2 210.86 173.44 180.71 168.26
K3 186.08 167.96 168.16 178.56
R 79.79 18.64 12.55 12.94
K1 124.14 141.04 142.25 141.53
K2 163.74 145.54 147.08 136.77
K3 141.07 142.38 139.62 150.65
R 39.61 4.50 7.46 13.87

表9 细辛和延胡索超临界CO2萃取正交实验结果

Tab.9 Orthogonal experiment results of supercritical CO2 extraction process of asarum and corydalis

表10 细辛超临界CO2萃取的方差分析结果
Tab.10 Results of variance analysis on supercritical CO2 extraction process of asarum
误差来源 离差平方和 自由度 方差 F P
石蜡(A) 1111.97 2.00 555.99 35.68 <0.05
单甘酯(B) 61.22 2.00 30.61 1.96 >0.05
凡士林(C) 31.18 2.00 15.59 1.00 >0.05
甘油(D) 31.17 2.00 15.58 1.00

F0.05(2,2)=19.00;F0.01(2,2)=99.00

表10 细辛超临界CO2萃取的方差分析结果

Tab.10 Results of variance analysis on supercritical CO2 extraction process of asarum

表11 延胡索超临界CO2萃取的方差分析结果
Tab.11 Results of variance analysis on supercritical CO2 extraction process of corydalis
误差来源 离差平方和 自由度 方差 F P
石蜡(A) 263.27 2.00 131.63 74.01 <0.05
单甘酯(B) 3.56 2.00 1.78 1.00
凡士林(C) 9.55 2.00 4.77 2.68 >0.05
甘油(D) 33.13 2.00 16.57 9.31 >0.05

F0.05(2,2)=19.00;F0.01(2,2)=99.00

表11 延胡索超临界CO2萃取的方差分析结果

Tab.11 Results of variance analysis on supercritical CO2 extraction process of corydalis

以细辛脂素含量为评价指标,由直观分析极差R可知影响超临界CO2的因素大小顺序为:A>B>D>C,优选条件为A2B1C2D1;以延胡索乙素含量为评价指标,由直观分析极差R可知影响回流的因素大小顺序为A>D>C>B,选择A2B2C2D3;从表8和表9结果可以看出,仅萃取釜压力对延胡索和细辛的提取效果产生显著影响(P<0.05)。综合两项实验结果,确定超临界CO2萃取优选工艺条件为:萃取压力25 Mpa,萃取温度40 ℃,95%乙醇为夹带剂,其用量为药材用量的3倍。

2.9 乳化型膏贴基质配比的正交实验结果

乳化型膏贴基质配比的正交实验结果见表12,13,综合评分方差分析结果见表14。

表12 乳化型膏贴基质配比的正交实验结果
Tab.12 Orthogonal experiment results of matrix ratio of emulsion paste
序号 石蜡
(A)
单甘酯
(B)
凡士林
(C)
甘油
(D)
综合
评分
g
1 2 2 1 1 14
2 2 4 2 2 16
3 2 8 3 3 10
4 4 2 2 3 14
5 4 4 3 1 12
6 4 8 1 2 14
7 6 2 3 2 8
8 6 4 1 3 10
9 6 8 2 1 12
K1 40 36 38 38
K2 40 38 42 38
K3 30 36 30 34
R 10 2 12 4

表12 乳化型膏贴基质配比的正交实验结果

Tab.12 Orthogonal experiment results of matrix ratio of emulsion paste

表13 基质配比正交实验综合评分计算
Tab.13 Comprehensive scores of orthogonal experiment on matrix ratio
实验号 软硬度 黏性 均匀度 熔化性 综合评分
1 4(适中) 2(太黏) 4 4 14
2 4(适中) 4(适中) 4 4 16
3 2(太软) 2(不黏) 2 4 10
4 2(偏软) 4(适中) 4 4 14
5 2(偏软) 2(太黏) 4 4 12
6 4(适中) 4(适中) 2 4 14
7 2(偏软) 2(太黏) 2 2 8
8 2(偏硬) 2(不黏) 2 4 10
9 2(偏软) 2(太黏) 4 4 12

表13 基质配比正交实验综合评分计算

Tab.13 Comprehensive scores of orthogonal experiment on matrix ratio

表14 基质配比正交实验的方差分析结果
Tab.14 Results of variance analysis on orthogonal experiment of matrix ratio
误差来源 离差平方和 自由度 方差 F P
石蜡(A) 22.22 2.00 11.11 25.00 <0.05
单甘酯(B) 0.89 2.00 0.44 1.00
凡士林(C) 24.89 2.00 12.44 28.00 <0.05
甘油(D) 3.56 2.00 1.78 1.00 >0.05

F0.05(2,2)=19.00;F0.01(2,2)=99.00

表14 基质配比正交实验的方差分析结果

Tab.14 Results of variance analysis on orthogonal experiment of matrix ratio

表12,14结果可知,石蜡与凡士林用量是影响基质成型的关键因素,直观分析极差R显示影响因素大小顺序为C>A>D>B,优选配比为A1B2C2D1,即将石蜡2 g,单甘酯4 g,凡士林2 g分别加热熔化后,与甘油1 g混合均匀制成乳化型膏贴基质。

2.10 乳化型膏贴剂型的体外经皮渗透实验

笔者在本研究前期将白芥子涂方药材提取物制备为高含水量的巴布凝胶剂型[4],并利用改良Franze透皮扩散装置,进行了两种基质类型膏贴剂的离体大鼠皮肤透皮比较实验,结果见图2。从研究结果可以看出,对于细辛酯素和延胡索乙素两项透皮指标,乳化型膏贴的累积渗透量均明显高于巴布凝胶剂型,这可能是由于前者具有较高的载药量以及较好的皮肤角质层亲和能力与水化作用。

图2 白芥子涂方乳化型膏贴剂与巴布凝胶剂体外经皮渗透对比实验结果(x¯±s,n=6)

Fig.2 Comparison of percutaneous permeation between Baijiezi Tufang emulsifiable paste patch and cataplasm formulations in vitro(x¯±s,n=6)

3 讨论

白芥子涂方穴位敷贴以原粉入药,不仅有效成分含量低,而且不利于质量控制,笔者在本研究采用超临界CO2萃取技术对目标成分进行选择性高效提取[4],并采用HPLC法对其含量进行控制,制备出具有乳化性质的硬膏剂型。该剂型与其他外用膏贴剂相比在载药量、熔化性、均匀性、乳化性能、透皮性能方面具有显著特点,同时体外经皮渗透实验验证了超临界CO2萃取技术应用于经皮给药制剂脂溶性有效成分提取的可行性与合理性,为进一步研究指标成分透皮行为奠定基础。

有研究证实,白芥子中芥子酶活性[6],以及甘遂中大戟二萜醇浓度[7,8]是引起皮肤刺激性的关键影响因素,有效控制系统中这两种成分浓度水平以及释放速率,可有效避免目前白芥子涂方皮肤刺激性大和质量不可控的弊端。

The authors have declared that no competing interests exist.

参考文献

[1] 清·张璐.张氏医通[M].北京:中国中医药出版社,1995:85.
[本文引用:1]
[2] 徐彬. 汇涵术泰对冬病夏治“三伏贴”后所致皮肤损害的护理疗效观察[J].实用临床护理学杂志,2017,28(2):151-152.
[本文引用:1]
[3] 张红丽,赵铭辉,傅立新.三伏贴治疗变异性鼻炎近期疗效及不良反应的观察[J].中国针灸,2016,36(1):33-36.
[本文引用:1]
[4] 刘敏,徐宏峰,余南才,.新型超临界CO2萃取物三伏贴巴布剂的经皮渗透[J].中国医院药学杂志,2015,35(9):803-805.
[本文引用:3]
[5] 国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[M].北京:中国医药科技出版社,2015:88,139-140,160-161,230-231.
[本文引用:3]
[6] 欧敏锐,吴国欣.中药白芥子研究概述[J].海峡药学,2001,13(2):8-11.
[本文引用:1]
[7] 邱韵萦. 大戟科大戟属有毒中药粗制解毒研究[D].南京:南京中医药大学,2012:6.
[本文引用:1]
[8] 王立岩. 甘遂的化学成分及其生物活性的研究[D].沈阳:沈阳药科大学,2003:7.
[本文引用:1]
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关键词(key words)
白芥子涂方
乳化型膏
回流萃取
超临界二氧化碳萃取
正交实验

White mustard
Emulsified plaster
Reflux extraction
Supercritical CO extracti...
Orthogonal experiment

作者
刘新国
黄文涛

LIU Xinguo
HUANG Wentao