目的 探索伊曲康唑凝胶的制备方法,并考察其体外透皮给药性能与特点。方法 以卡波姆940为基质,以外观性状、涂展性、稳定性、耐热耐寒实验为综合观察指标,采用正交设计法优化处方,制备伊曲康唑凝胶。采用改良Franz扩散池,高效液相色谱(HPLC)法测定伊曲康唑含量,评价伊曲康唑凝胶体外透皮性能与特点。结果 伊曲康唑凝胶最优处方为伊曲康唑含量1%,卡波姆含量1%,聚乙二醇-400(PEG-400)含量15%,甘油含量10%。制得的伊曲康唑凝胶均匀细腻、稳定性好,在常温时保持胶状。体外释放实验表明,伊曲康唑凝胶体外释放符合Higuchi方程,随着时间延长其累积释放量也逐步增加,具有缓释效果。结论 伊曲康唑凝胶处方设计合理,性质稳定,具有缓释效果,可提高患者依从性。
Objective To study the preparation method of the itraconazole gel formulation,and investigate its drug performance and characteristics in topical transdermal drug delivery. Methods Itraconazole gel was prepared with carbomer 940 as matrix,of which optimal formulation parameters were screened according to the appearance quality test, spreading property, stability and cold-heat resistance by orthogonal experiments.And the drug performance and characteristics of the transdermal delivery of the itraconazole gel formulation were evaluated by a modified Franz diffusion cell technique and HPLC. Results The best formulation parameters were as follows,1% itraconazole,1% carbomer,15% PEG-400 and 10% glycerin.As the
伊曲康唑几乎不溶于水,因此其口服制剂生物利用度低,全身大剂量给药易导致不良反应,局部外用制剂可避免全身性不良反应。笔者在本实验制备伊曲康唑凝胶外用制剂,该制剂可长时间停留于瘤体表面,使药物与皮肤充分接触,发挥良好药效,降低毒性,并具有缓释效果,提高用药依从性,对于开发治疗IH的伊曲康唑外用制剂具有一定应用前景。
Waters高效液相色谱系统,包含:Waters717自动进样器,1525四元泵,2487紫外检测器,breeze数据获取处理系统(美国Waters公司);Waters ODS2(250 mm×4.6 mm,5 μm)色谱柱(美国Waters公司);TP-2A/3A型智能药物透皮扩散实验仪(上海互佳仪器设备有限公司);PHS-3CPH计(上海精密科学仪器有限公司),XY-80A涡旋混合器(上海医大仪器厂),XMTD-204数显式电热恒温水浴锅(常州诺基仪器有限公司),SB25-12D超声波清洗机(宁波新芝生物科技有限公司),AL104电子分析天平[梅特勒-托利多仪器(上海)有限公司,感量:0.1 mg]。
伊曲康唑原料药(武汉东康源科技有限公司,含量:99.7%,批号:20161101),卡波姆940(德国BASF公司,批号:WPOG565B,含量:99%),三乙醇胺(分析纯,天津市东丽区天大化学试剂厂,批号:20171015);二甲亚砜(DMSO,分析纯,天津市登丰化学品有限公司,批号:20170901),聚乙二醇(PEG,北京市海淀会友精细化工,批号:FA7030291,含量:99.9%),噻酮(南京龙潭精细化工有限公司,批号:20170412,含量:99%),甘油(郑州祖辉化工产品有限公司,批号:20171217011,含量:99.7%),甲醇(色谱纯,天津四友精细化妆品有限公司,批号:533776-08616)。
2.1.1 伊曲康唑凝胶基质与辅料的选择 卡波姆940是一类非常重要的流变调节剂,三乙醇胺中和卡波姆等酸性高分子凝胶后可得到优质凝胶基质,低浓度即可形成高黏度凝胶[6]。以卡波姆940为基质制得的凝胶易涂展,无油腻性,黏附性和均匀性良好,对皮肤和黏膜无刺激性,不污染衣物,药物呈零级或近似零级释放[7]。用卡波姆制备的凝胶浓度一般为0.5%~2.0%[8]。
伊曲康唑为脂溶性药物,在水中几乎不溶,油水分配系数(lgP)为5.66,lgP在1~3的药物具有良好的透皮潜能,需用三乙醇胺作为pH值调节剂。PEG-400为液体,与各种溶剂广泛相容,是很好的溶剂和增溶剂。DMSO有“万能溶剂”之称,是最常用的溶剂,集溶剂和渗透促进剂的优点于一身,是最早和最广泛研究的渗透促进剂之一,具有高渗透性[9]。
噻酮是近年来发现的新型外用制剂促渗剂。其高效促渗作用得到广泛关注,将1%噻酮作为药物促渗剂可提高临床疗效[10]。
2.1.2 正交设计优选处方 经查阅文献,结合预实验,确定处方为伊曲康唑含量1%、DMSO含量5%、噻酮含量1%、三乙醇胺适量。根据2015年版《中华人民共和国药典》对凝胶的要求优选处方,确定影响凝胶形成的3个重要因素,分别为卡波姆用量(A,0.5%~2.0%)、甘油用量(B,5%~10%)、PEG-400用量(C,10%~15%),利用L9(34)正交表进行处方设计优化,见
正交设计方案和结果见
2.1.3 稳定性实验 取优选后的同一批样品,分别在室温放置0,2,4,6,8,12,24 h,测得其峰面积分别为467 834,455 697,455 987,462 025,455 127,449 879,450 120,计算得RSD为1.4%(
取3批已放置一周的伊曲康唑凝胶样品各3 g,置于离心管,以10 000 r·min-1 离心20 min,凝胶无分层。
2.2.1 色谱条件与溶液的配制 色谱柱:迪玛ODSC18柱(4.6 mm×250 mm,5 μm);流动相:甲醇-水(体积比90:10);流速:1.0 mL·min-1;检测波长:261 nm;柱温:25 ℃;进样量:20 μL。
供试品溶液:精密称取伊曲康唑凝胶0.1 g,置烧杯中,加入适量甲醇溶解,摇匀,超声10 min溶解完全后,转移至100 mL量瓶,用甲醇定容,摇匀,得10 μg·mL-1的溶液。经孔径0.45 μm微孔滤膜过滤,取续滤液为供试品溶液。
对照品溶液:精密称取干燥至恒重的伊曲康唑原料药0.02 g于100 mL量瓶,加适量甲醇溶解并定容,摇匀,稀释后得10 μg·mL-1对照品溶液。
2.2.2 标准曲线的绘制 精密称取伊曲康唑25.00 mg于25 mL量瓶,加适量甲醇,超声溶解,再用甲醇定容至刻度,摇匀。精密量取上述溶液1.00 mL至25 mL量瓶,加甲醇定容至刻度,摇匀,得40 mg·L-1伊曲康唑储备液。分别精密量取该储备液0.5,1.0,2.0,3.0,4.0,5.0 mL至10 mL量瓶,加甲醇定容至刻度,摇匀,得一系列标准液,分别进样,采用HPLC法测定,得标准曲线方程
2.2.3 精密度实验 取供试液20 μL进样,测定。取峰面积积分值计算得日内精密度RSD值为1.11%。连续3 d每天测定6份样品的精密度,方法同上。得日间RSD为1.47%。结果表明精密度良好。
2.2.4 回收率实验 按处方量配制3份不含伊曲康唑的空白凝胶基质,分别加入80%,100%,120%处方量的伊曲康唑原料药,按“2.1.1”项方法配制溶液,测定其峰面积,计算得回收率分别为96.5%,100.4%,95.3%。平均回收率为97.4%,RSD为1.99%。
取处理好的大鼠皮,剪成适当大小,将鼠皮固定于改进的Franz立式扩散池接受器上口,表皮层在上。其中扩散池的有效渗透面积(A)为3.4 cm2。一般用0.9%氯化钠溶液作为接受液来模拟人体皮肤生理环境,由于伊曲康唑水溶性很差,故在0.9%氯化钠溶液中加入PEG-400增加其溶解度,加入PEG-400体积分数为20%。在接受室中加入接受液15 mL,使接受液与处理好的大鼠皮充分接触。称取凝胶1.0 g均匀涂在皮肤表面,固定装置。将此装置置于温度为(32.0±0.5)℃TP-2A/3A型智能药物透皮扩散实验仪上,磁力搅拌,并开始计时。分别于1,2,4,6,8,10,12,24 h抽取接受液3 mL,并同时加入等体积同温度空白接受液。取出的接受液过孔径0.45 μm滤膜,弃去初滤液,取续滤液20 μL进样,记录峰面积,求药物浓度,计算累积释药量。
样品的制备:取凝胶0.1 g,加适量含20%PEG-400的0.9%氯化钠溶液溶解,超声10 min,再转移至100 mL量瓶,用20%PEG-400的0.9%氯化钠溶液定容即得10 μg·mL-1样品溶液。
式中:
伊曲康唑凝胶在大鼠皮肤上的累积渗透量结果, 其24 h皮肤累积渗透量
伊曲康唑为脂溶性药物,在水中几乎不溶,故考虑先将伊曲康唑溶于有机溶剂,再与基质混合均匀。根据2015年版《中华人民共和国药典》,结合实际凝胶评选标准,利用正交设计进行处方优化,最后筛选出处方最佳配比为卡波姆1.0%,PEG-400 15%,甘油用量10%,制得的凝胶均匀细腻,性质稳定。选择合适的体外透皮实验条件是反映药物透皮吸收特征的重要因素[12]。由于伊曲康唑为脂溶性药物,故在0.9%氯化钠溶液中加入PEG-400来增加其溶解度。体外渗透实验结果表明伊曲康唑凝胶体外释放率高,该药物具有缓释作用效果,有部分伊曲康唑贮存在皮肤中,随着时间的累积其贮存量也越来越多,这将有利于IH的治疗。
目前国内外伊曲康唑的上市制剂有伊曲康唑胶囊、伊曲康唑软膏、伊曲康唑口服液,用于治疗真菌性疾病,HIV阳性或免疫系统损伤患者的口腔或食道念珠菌病[13]。伊曲康唑暂无适于治疗IH的制剂,将其制成凝胶有利于药物充分吸收,且安全性良好,可提高患者依从性,用于治疗IH具有价值。后期将对伊曲康唑的药效学及作用机制做进一步的探索。
The authors have declared that no competing interests exist.