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医药导报
医药导报, 2019, 38(2): 244-247
doi: 10.3870/j.issn.1004-0781.2019.02.023
胆酸钠片质量状况及现行标准
郭江红, 王文晞, 马妮, 胡远华, 姜红
湖北省药品监督检验研究院,武汉 430064

作者简介 郭江红(1976-),女,湖北人,副主任药师,从事药物分析及药物质量标准研究。ORCID:0000-0001-6809-1090。电话:027-87895873,E-mail:guojh26@hotmail.com。
中图分类号: R927.11     文献标识码: B     文章编号: 1004-0781(2019)02-0244-04
摘要:

目的 评价胆酸钠片的质量现状及存在问题,并对现行质量标准进行评价。方法 按照国家评价性抽验的总体要求,按照现行标准检验,开展种属来源鉴别、组成成分质谱分析、钠离子含量测定及安全性方面等探索性研究,对不同分析方法所得的结果进行统计分析,综合评价胆酸钠片的质量现状及质量标准控制水平。结果 按照法定标准检验,30批次样品合格率为 100%。探索性研究显示,30批次样品均来自猪胆汁;30批次样品中均未检出胆酸钠,其主要成分为各种胆汁酸钠盐的混合物,药品名称与实际有效成分不符;总胆汁酸含量40%~71%,钠离子含量3.6%~5.7%;不同企业样品溶出行为存在差异。安全性研究中,30批次样品均未检出胆红素与胆固醇残留。结论 按现行标准检验,胆酸钠片总体合格率高;但现行标准不能有效控制产品质量,缺少动物来源种属鉴别和钠离子含量控制,含量测定方法专属性较差。
关键词: 胆酸钠片 ; 胆酸 ; 去氧胆酸 ; 质量状况 ; 现行标准

Abstract:

动物胆汁作为药物使用在中国已经有上千年历史,具有清热解毒、止咳平喘等功效[1]。胆汁酸是动物胆汁的主要有效成分,其主要结构是以环戊烷多氢菲为核心的二十四碳胆烷羧酸,不同动物分泌不同类型胆汁酸的临床功效也不尽相同[2]。胆酸钠系自牛或猪胆中提取的胆汁酸盐的混合物。临床上作为利胆药,用于胆汁缺乏及胆囊炎等。胆酸钠片是胆酸钠制成的糖衣片。其不良反应主要为胃肠道反应和皮疹。国内企业最早于1995年获得胆酸钠及胆酸钠片的批准文号。胆酸钠片目前全国共有生产企业17家,批准文号18个;但大部分企业长期不生产;现行标准为中华人民共和国卫生部药品标准二部六册(生化药品第一分册),标准中收载了化学与薄层色谱鉴别,崩解时限及含量测定(乙醚萃取称重法)。国外尚无该品种上市。胆酸钠片是国家评价性抽验品种,笔者根据原国家食品药品监督管理总局统一安排,参考文献[3,4,5,6,7,8,9,10,11,12]报道,对抽取30批不同企业生产胆酸钠片实施法定检验,并进行探索性研究,全面考察该品种的质量现状及现行法定标准水平。

1 仪器与试药
1.1 仪器

液质联用飞行时间质谱仪(Waters G2-S Q-TOF LC/MS),TAS-986型原子吸收分光光度计,Mars微波消解仪、AG-135电子天平(梅特勒-托利多仪器公司,感量:0.1 mg),DHG-9036A电热恒温鼓风干燥箱,AT7 Smart型智能溶出度仪,Evolution-300型紫外可见分光光度计,millipore超纯水机,MATRIX-F 近红外光谱仪。

1.2 试药

胆酸对照品(批号:10078-0013)、猪去氧胆酸对照品(批号:100087-200610)、鹅去氧胆酸对照品(批号:110806-200704)、牛磺鹅去氧胆酸对照品(批号:110846-200506)、熊去氧胆酸对照品(批号:100087-200610)、去氧胆酸对照品(批号:110724-200207)购自中国食品药品检定研究院;牛磺猪去氧胆酸(批号:079K0045)、牛磺熊去氧胆酸(批号:119K0052)购自Sigma公司;甘氨猪去氧胆酸(批号:TRC24-CF-57-3)、牛磺胆酸(批号:LF50N06)、甘氨鹅去氧胆酸钠(批号:LJ20O26)等由企业提供。钠离子标准溶液(国家有色金属及电子材料分析测试中心,唯一标识:13432-2,规格:1000 μg·mL-1)、硝酸(色谱纯)。

2 方法与结果
2.1 抽样简介

全国共有生产企业17家,批准文号18个;但大部分企业并未生产,所以仅抽取到2个生产企业30批次样品,涉及2个批准文号;其中生产企业抽样2批次,占样品总数6.7%; 在药品经营企业抽取27批次,占样品总数90.0%;在医疗机构抽取1批次,占样品总数3.3%。从抽取样品的地域分布来看,胆酸钠片分布在8省市自治区,其中,安徽、江苏、上海最多,均为6批次。

2.2 依据现行质量标准检验结果及分析

本次抽取样品均按中华人民共和国卫生部药品标准二部六册(生化药品第一分册)检验,该标准出版于1998年,该品种标准一直未进行增修订。检验项目比较简单,主要包括:性状、鉴别、崩解时限与含量测定等4项;30批次样品均符合规定,合格率为100%。其中崩解时限规定“应在1 h内完全崩解”,30批次样品的崩解时限为21~39 min;30批次样品含量测定结果为69.6%~77.8%,均符合“本品含胆酸不得少于标示量的65%”的规定。

2.3 探索性研究结果及分析

结合企业现场调研、质量标准现状及检验情况,针对药品的有效性、安全性及质量可控性等方面,开展了产品的来源、有效成分、钠离子含量、溶出行为及安全性等方面探索性研究。

2.3.1 种属来源鉴别 胆酸钠原料药标准中规定“本品系自牛或猪胆中提取的胆汁酸盐混合物”,但不同动物的胆汁中胆汁酸成分有较大差别。据文献报道,猪胆汁中主要游离胆汁酸为猪去氧胆酸和鹅去氧胆酸[4],牛胆汁中主要游离胆汁酸为胆酸和去氧胆酸[5]。采用薄层色谱法对样品中的胆汁酸成分进行初步分析,对动物来源的胆汁酸进行区分。

按照现行标准薄层色谱鉴别项下方法:取本品,除去包衣,研细,称取约2 g,加水10 mL,振摇溶解,作为供试品溶液。精密称取猪去氧胆酸与鹅去氧胆酸对照品,分别加甲醇制成1 mg·mL-1的溶液,作为对照品溶液。照薄层色谱法(《中华人民共和国药典》2015年版四部通则0502),吸取上述溶液各2 μL,点于同一硅胶G薄层板上,以异辛烷-正丁醚-冰醋酸(8:5:5)为展开剂,展开后,喷以10%磷钼酸乙醇溶液,在105 ℃干燥5 min。结果显示:本次抽样30批次样品薄层色谱鉴别均检测出猪去氧胆酸和鹅去氧胆酸的斑点,提示所用胆汁来源均为猪胆汁,薄层色谱图见图1。


图1 胆酸钠片胆汁薄层色谱图
1.猪去氧胆酸对照品;2.鹅去氧胆酸对照品;3.企业A样品(20131201);4.企业B样品(130402)

2.3.2 有效成分研究 本品名为胆酸钠片,有效成分应为胆酸钠,即3α,7α,12α-三羟基-5β-胆烷酸单钠盐,但该品种原料药胆酸钠项下描述为胆汁酸盐混合物,与品种名称不符,故采用Q-Tof LC/MS法对样品中成分进行分析鉴定。

质谱分析条件:采用BEH C18色谱柱(100 mm×2.1 mm,130 Å),流动相A为水(含0.01%甲酸),B为乙腈,C为甲醇,按表1进行梯度洗脱,流速为0.6 mL·min-1,柱温 35 ℃;检测器采用质谱检测器,离子源为ESI负离子模式,采集模式为MSE,相对分子质量为50~1200,Trap电压50~60 V,椎孔电压40 V。结果见图2,表2。30批次胆酸钠片所含已知胆汁酸成分由猪去氧胆酸、牛磺猪去氧胆酸、甘氨猪去氧胆酸、鹅去氧胆酸、牛磺鹅去氧胆酸、甘氨鹅去氧胆酸、牛磺石胆酸和甘氨石胆酸组成。此外,还含有两种未知胆汁酸成分,经过查阅文献和MassFragment软件预测,推测其为牛磺5-氧代-3α,6α-二羟基-24-胆烷酸和甘氨5-氧代-3α,6α-二羟基-24-胆烷酸。两家生产企业胆酸钠原料均来自猪胆,所含胆汁酸成分一致。

表1 流动相梯度洗脱表 %
时间/min A B C
0.00 50 20 30
~4.50 50→25 20 30→55
>4.50~4.60 25→50 20 55→30
>4.60~5.50 50 20 30

A:水(含0.01%甲酸);B:乙腈;C:甲醇

表1 流动相梯度洗脱表 %


图2 胆酸钠片总离子流图

表2 胆酸钠片各胆汁酸成分信息表
峰号 保留时
间/min		 荷质比
m/z		 与已知对照品是否匹配
1 1.04 514.2847 否
2 1.28 498.2893 是(牛磺猪去氧胆酸)
3 1.52 464.3015 否
4 1.81 48.3054 是(甘氨猪去氧胆酸)
5 2.69 498.2894 是(牛磺鹅去氧胆酸)
6 3.08 391.2848 是(猪去氧胆酸)
7 3.27 448.3066 是(甘氨鹅去氧胆酸)
8 4.08 482.2948 是(牛磺石胆酸)
9 4.49 391.2843 是(鹅去氧胆酸)
10 4.61 432.3107 是(甘氨石胆酸)

表2 胆酸钠片各胆汁酸成分信息表

2.3.3 各胆汁酸成分含量测定 采用上述LC-MS法对确证的胆汁酸盐成分进行含量测定,分析不同厂家,不同批次样品之间各组分含量差异。结果显示:30批次胆酸钠片总胆汁酸含量为39.6%~71.4%,两家企业测定值范围及均值见表3。企业B总胆汁酸含量明显高于企业A,且批间含量差异较小,提示该生产企业从原料制备到制剂生产稳定性较好;30批次胆酸钠片中,鹅去氧胆酸、甘氨牛磺结合鹅去氧胆酸、猪去氧胆酸与甘氨牛磺结合猪去氧胆酸分别占总胆汁酸含量95.5%(企业A)和96.6%(企业B),由于牛磺酸和甘氨酸结合型胆汁酸只是增加胆汁酸在体内的溶解度,他们的疗效同游离胆汁酸一致,因此,本次抽样涉及的两家生产企业产品的有效成分均为猪去氧胆酸和鹅去氧胆酸。

表3 胆酸钠片总胆汁酸含量测定结果 %
生产企业 批数 最小值 最大值 均值 RSD
企业A 18 39.6 57.5 46.6 12.4
企业B 12 50.0 71.4 61.6 8.1

表3 胆酸钠片总胆汁酸含量测定结果 %

2.3.4 样品中钠含量测定 本品为胆汁酸钠盐,现行标准中未对钠离子进行控制,拟采用原子吸收分光光度法测定样品中钠离子。检测波长:589.0 nm,狭缝宽度:0.5 nm,灯电流:5.0 mA,气体:空气-乙炔。在该条件下进行方法学实验,当钠离子对照品溶液浓度为0.2~2.0 μg·mL-1,吸收值与浓度呈良好线性,回归方程为 Y=3.003 6X-0.082 9,r=0.999 0;检出限为0.01 μg·mL-1;连续测量6次,含量的RSD为0.37%,方法精密度良好;加样回收率平均值为100.4%,RSD=1.7%(n=6),表明该方法准确度较好。样品测定结果显示:30批次胆酸钠片钠离子含量为3.6%~5.6%,各生产企业测定值范围及均值见表4。两家生产企业钠离子含量差异无统计学意义(P>0.05)。

表4 胆酸钠片钠离子含量考察结果 %
生产企业 批数 最小值 最大值 均值 RSD
企业A 18 3.6 5.0 4.4 11.2
企业B 12 4.4 5.6 5.0 7.0

表4 胆酸钠片钠离子含量考察结果 %

2.3.5 溶出行为研究 胆酸钠片作为动物胆汁提取的多组分生化药糖衣片,现行标准中并未设定溶出度检查项,拟开展胆酸钠片的溶出行为研究,通过比较不同企业样品的溶出曲线,考察不同企业样品内在质量的差异,评价工艺的一致性。

由于胆酸钠在偏酸性的条件下不溶解,并且会析出絮状沉淀,因此,选取水作为溶出介质;采用浆法,每分钟75转,210 nm为测定波长。采用自身对照法:取20片,研磨,置500 mL量瓶中,加水适量,超声20 min使溶解,滤过,取续滤液适量,加水稀释到每毫升含0.1 mg的溶液,作为自身对照。分别在15,30,45,60,75,135,195,255 min取样测定溶出度并绘制溶出曲线。两家生产企业样品溶出曲线见图3。结果显示:两家生产企业样品在100 min后才达到溶出平台,企业A样品比企业B在前期溶出较为缓慢,在75 min时达到平台,企业B样品溶出较缓和。溶出曲线中累积溶出量,采用f2相似因子法评价曲线相似性。结果显示,两家生产企业样品溶出行为不相似(f2<50.2)。提示两家生产企业制剂工艺存在差异。


图3 两家企业胆酸钠片溶出曲线图

2.3.6 安全性方面考察 胆酸钠在提取过程中可能会有胆红素、胆固醇等有机物的残留,此外,动物饲养过程中因环境、饲料等因素可能造成的重金属及其他有害物质的的蓄积,也需要严格控制。因此,采用高效液相色谱法对样品中胆红素与胆固醇残留进行检测[8],30批次样品均未检出胆红素残留与胆固醇残留。收集企业A生产的3批胆酸钠原料药,采用原子吸收分光光度法和原子荧光法对原料中汞(Hg)、砷(As)、铅(Pb)等进行考察,3批次原料药中汞、砷、铅残留总和在4 mg·kg-1 内,具体见表5。

表5 3批胆酸钠原料汞、砷和铅含量检测结果 mg·kg-1
原料批号 汞 砷 铅
20140803 未检出 0.36 3.70
20140804 未检出 0.30 3.35
20140901 未检出 0.28 3.83

表5 3批胆酸钠原料汞、砷和铅含量检测结果 mg·kg-1

3 讨论

胆酸钠片中有效成分应为胆酸钠,该品种说明书中对该品种成分的描述为“胆酸钠化学名:3α,7α,12α-三羟基-5β-胆烷酸”;但探索性研究结果表明,胆酸钠片中未检出胆酸钠,主要成分为猪去氧胆酸和鹅去氧胆酸以及其与甘氨酸、牛磺酸结合钠盐。胆酸钠片适应证为利胆,用于胆汁缺乏及胆囊炎。文献查阅发现不同种类的胆汁酸,除了具有利胆作用外,还有很多不同功效,如胆酸还具有解热、镇痛、抗炎的功效,猪去氧胆酸能降低三酰甘油,适用于Ⅰa或Ⅰb型高血脂症、动脉粥样硬化症。本品实际是多组分胆汁酸药品,因此其适应证应依据胆汁酸种类的不同重新修订。建议生产企业更改制剂名称,重新修订说明书中成分、适应证等相关信息。

胆酸钠原料药系从牛或猪胆中提取获得,为动物内脏来源的生化药。动物内脏可能积累铅、砷、汞等有害物质,因此在原料药质量标准中应对有害元素进行控制,但原料药现行标准中为对重金属及其他有害物质未进行控制。建议在原料药标准中增订相关有害物质检查项。胆酸钠片现行质量标准包括鉴别,片剂相关检查及含量测定,项目设置过于简单,现行标准不能有效控制产品质量。①本品为猪胆汁或牛胆汁提取的胆汁酸盐,现行质量标准并未设定相应的鉴别项对不同种属来源动物进行区分;不同动物来源的胆汁中胆汁酸成分存在较大差异,而不同胆汁酸成分有着截然不同的临床疗效。建议标准中增订对胆汁来源的控制,建立薄层色谱法,对牛和猪来源的胆汁酸进行鉴别。②本品为胆汁酸钠盐,现行标准中并未对钠离子的含量进行控制,应建立原子吸收分光光度法对钠离子进行控制。③现行标准中含量测定采用乙醚萃取称重法,该方法专属性较差,不能有效控制产品中各胆汁酸含量,目前《欧洲药典》(EP8.0)中熊去氧胆酸有关物质检查采用高效液相-示差法,能有效分离多种游离胆汁酸[13],文献报道有专属性更强的方法可分析不同游离胆汁酸[14],因此建议建立高效液相色谱等专属性较强的方法进行含量测定。

The authors have declared that no competing interests exist.
参考文献
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动物胆汁是我国传统中药材，其资源丰富，应用历史悠久。主要来源包括猪、蛇、鸡、牛。胆汁明目、清肺化痰、清热解毒等功效显著，其主要活性成分为胆汁酸类。本文总结了动物胆汁的化学成分、药理作用及应用，以期为其深入研究和开发应用提供科学依据。
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天然牛黄是中国传统名贵中药材，来源于牛的胆囊、胆管或肝管中干燥后的胆结石。为满足临床需要，近年来相继研制出了人工牛黄、体外培育牛黄等品种。牛黄中主要含有胆红素类、胆汁酸类、氨基酸类、无机元素类等成分，胆汁酸类是牛黄类药材中除胆红素外的第二大类活性成分，与牛黄的解热镇痛、抗炎、利胆保肝、降压和镇咳等药理作用有密切关系。本文就牛黄类药材及其制剂中胆汁酸类成分的药理作用和含量测定方法的研究进展进行了综述和总结，旨在为牛黄的深入研究和质量控制提供参考依据。
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目的从提取胆红素下脚料中同时提取三种胆汁酸。方法混合猪胆汁酸粗品在硫酸催化下形成甲酯,利用猪去氧胆酸甲酯与苯形成的加合物不溶于苯的性质将其分离出来;用乙酸酐将剩余胆汁酸甲酯中的所有羟基转化为乙酸酯,利用猪胆酸甲酯三乙酸酯在正己烷中溶解度低的性质,使其分离,最后用无水乙醇结晶分离出鹅去氧胆酸甲酯二乙酸酯。所得各种猪胆汁酸酯经乙醇-NaOH溶液水解得到纯猪去氧胆酸、猪胆酸和鹅去氧胆酸,并对产物结构进行了表征,纯度经HPLC测定均大于98%。结果通过一次工艺流程分离出三种胆酸,含量均大于98%。结论该提取工艺提高了原料的利用率,适合工业化生产。
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The selected bile acids such as: cholic acid (C), glycocholic acid (GC), glycolithocholic acid (GLC), deoxycholic acid (DC), chenodeoxycholic acid (CDC), glycodeoxycholic acid (GDC), lithocholic acid (LC) were separated by using thin layer chromatography on glass plates precoated with silica gel 60 with a concentrating zone. A robust and sensitive detection procedure for selected bile acids using the sulphuric acid as a visualizing reagent was described. Phosphomolybdic acid (10%) in ethanol was used as the comparative visualizing reagent. Spot intensities on the plates were quantified after dipping in sulphuric acid solutions and heating at temperatures from 60°C to 120°C for times ranging from 2 to 4502min. The best detection conditions for high signal intensity [AU] were determined. Particularly robust and sensitive detection of investigated bile acids separated was observed using the solution of sulphuric acid in methanol in the volume composition 1:19, and for temperature equal to 90°C and for heating for 2002min. Comparison and characterization of chromatographic spots of examined compounds on the basis of resolution (R S), separation factor (α), constant of the pair separation (R F α), and ΔR F values were discussed. The R S parameter, serving to evaluate the substance separation, was determined by visual and densitometric methods. It was proven that the R S parameter determined by the visual method for two adjacent substances is always larger than determined by the densitometric method. It was stated that the densitometric method is correct, objective, and assures standard conditions to the parameter R S determination. All bile acids have been best separated only by developing with n‐hexane‐ethyl acetate –methanol‐acetic acid in volume composition 20∶20∶5∶2 as the mobile phase.
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Animal biles and gallstones are popularly used in traditional Chinese medicines, and bile acids are their major bioactive constituents. Some of these medicines, like cow-bezoar, are very expensive, and may be adulterated or even replaced by less expensive but similar species. Due to poor ultraviolet absorbance and structural similarity of bile acids, effective technology for species differentiation and quality control of bile-based Chinese medicines is still lacking. In this study, a rapid and reliable method was established for the simultaneous qualitative and quantitative analysis of 18 bile acids, including 6 free steroids (cholic acid, chenodeoxycholic acid, deoxycholic acid, lithocholic acid, hyodeoxycholic acid, and ursodeoxycholic acid) and their corresponding glycine conjugates and taurine conjugates, by using liquid chromatography coupled with tandem mass spectrometry (LC/MS/MS). This method was used to analyze six bile-based Chinese medicines: bear bile, cattle bile, pig bile, snake bile, cow-bezoar, and artificial cow-bezoar. Samples were separated on an Atlantis dC18 column and were eluted with methanol cetonitrile ater containing ammonium acetate. The mass spectrometer was monitored in the negative electrospray ionization mode. Total ion currents of the samples were compared for species differentiation, and the contents of bile acids were determined by monitoring specific ion pairs in a selected reaction monitoring program. All 18 bile acids showed good linearity (r2>0.993) in a wide dynamic range of up to 2000-fold, using dehydrocholic acid as the internal standard. Different animal biles could be explicitly distinguished by their major characteristic bile acids: tauroursodeoxycholic acid and taurochenodeoxycholic acid for bear bile, glycocholic acid, cholic acid and taurocholic acid for cattle bile, glycohyodeoxycholic acid and glycochenodeoxycholic acid for pig bile, and taurocholic acid for snake bile. Furthermore, cattle bile, cow-bezoar, and artificial cow-bezoar could be differentiated by the existence of hyodeoxycholic acid and the ratio of cholic acid to deoxycholic acid. This study provided bile acid profiles of bile-based Chinese medicines for the first time, which could be used for their quality control.
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[10] 丁敏,叶炼,王猛,等.高效液相色谱-串联质谱法同时测定血清中游离和结合型胆汁酸[J].分析化学研究简报 2007,35(10):1506-1508.
建立了高效液相色谱-串联质谱同时测定血清中游离和结合型胆汁酸 的方法.血清样品经固相萃取后,在C18色谱柱上梯度洗脱,用负离子多反应监测模式检测.15种胆汁酸在0.10～100.0 μmol/L的浓度范围内与响应呈良好的线性,r为0.9990～0.9999;检出限为0.001～0.006 μmol/L;本方法的相对标准偏差日内不超过3.0%,日间不超过6.0%;平均回收率为86.0%～110.0%,适合于临床检测血清胆汁酸.
DOI:10.3321/j.issn:0253-3820.2007.10.025      URL    
[本文引用:1]
[11] 梅和珊,石朝周,王凯平,等.牛磺胆酸钠和牛磺鹅去氧胆酸钠的药效学比较研究[J].中国生化药物杂志,1999,20(3):198-200.
研究牛磺胆酸钠和牛磺鹅去氧胆酸钠的药理作用。方法：采用浓氨水引咳法、酚红排泌法、鼠耳肿胀及大鼠足跖肿胀法，观察动物给药后，牛磺胆酸钠和牛磺鹅去氧胆酸钠镇咳、祛痰和抗炎作用。结果：牛磺胆酸钠和牛磺鹅去氧胆酸钠可明显抑制氨水刺激所致小鼠咳嗽，延长咳嗽潜伏期；促进小鼠呼吸道分泌，增加酚红排泌量；抑制二甲苯致小鼠耳朵肿胀及角叉菜胶致大鼠足肿胀。结论：牛磺胆酸钠和牛磺鹅去氧胆酸钠均具有明显的镇咳、祛痰和抗炎作用。推测它们为蛇胆汁和鸡胆汁中的主要有效成分之一。
URL    
[本文引用:1]
[12] 冯承阳,张程亮,刘东.牛黄的现代研究(二):质量控制[J].医药导报,2017,36(2):117-122.
牛黄来源于牛的胆囊、胆管或肝管中干燥后的胆结石,是我国传统名贵动物药材,是多种方剂的配方组分之一。由于天然牛黄药源紧缺,价格昂贵,我国科研工作者相继研制出了人工牛黄、培植牛黄以及体外培育牛黄等替代品。牛黄中主要含有胆红素类、胆汁酸类、氨基酸类、胆固醇及无机元素等成分。由于牛黄及其不同替代品的共同存在,且药材本身成分非常复杂,因此对于该类药材的真伪鉴别、物质基础研究乃至质量控制一直都是牛黄药材和复方研究的难点和重点。目前对于该类药材的质量控制主要集中在胆酸和胆红素类成分上,学者们已经陆续对其他胆汁酸以及其余成分开始测试技术的研究,以期解决牛黄及其替代品的质量控制问题。该文就牛黄及其替代品所含化学成分研究进展进行回顾,同时针对胆红素、胆汁酸类、氨基酸类等成分测定技术的研究进展进行回顾与综述,旨在为牛黄及其替代品的质量控制提供参考依据。
DOI:10.3870/j.issn.1004-0781.2017.02.001      URL    
[本文引用:1]
[13] Ursodeoxycholic acid[S].European Pharmacopoeia 8.0(EP8.0):3512-3513.
[本文引用:1]
[14] 斯日古楞,刘小玲,李冬梅.等.超高效液相色谱快速分析不同哺乳动物胆汁中胆汁酸[J].分析化学,2015,43(5):675-681.
建立超高效液相色谱同时快速测 定胆汁中13种胆汁酸浓度的方法,并对种内种间差异进行统计学分析。色谱柱为Kyoto C18(100 mm×2.1 mm,2.2μm);流动相为乙腈-10 mmol/L KH2PO4溶液,梯度洗脱;流速:0.5 m L/min;检测波长200 nm。各种胆汁酸在各自测定浓度范围内与峰面积的线性关系良好(r0.9995);所有胆汁酸能够达到良好分离。13种胆汁酸检出限(S/N=3)在 0.2~0.6 ng/μL之间。与传统HPLC法相比,本方法简便、快速,精密度高,重现性好,适用于胆汁酸的分析。
DOI:10.11895/j.issn.0253-3820.150118      URL    
[本文引用:1]
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胆酸钠片
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作者
郭江红
王文晞
马妮
胡远华
姜红