目的 研究动物、矿物类中药饮片水煎液密度与出膏率的相关性。方法 测定15种动物类、10种矿物类共75批单味中药饮片水煎液密度和出膏率,通过K-均值聚类分析,结合实际情况分类,对不同类饮片水煎液密度与出膏率分别作相关回归分析,并对回归预测进行实验验证。结果 矿物类饮片和贝壳动物类饮片个案聚为一类,其水煎液密度和出膏率均低,二者之间无相关性;非贝壳动物类饮片作为一类,其水煎液密度和出膏率之间具有显著线性相关性,模拟线性方程为
Objective To investigate the correlation between the density of decoction and the rate of extract in animal decoction pieces and mineral decoction pieces. Methods The density of decoction and the rate of extract were determined in 75 batches of 15 kinds of animal decoction pieces and 10 kinds of mineral decoction pieces. The K-mean cluster analysis was carried out, and the classification was combined with the actual situation. Correlation regression analysis was made for the density of decoction and the rate of extract of different classes of decoction pieces. Regression forecast was validated by experiment. Results All the mineral decoction pieces and shell animal decoction pieces were gathered into one category. The density of decoction and the rate of extract were low, and there was no correlation between them. The animal decoction pieces other than shellfish were taken as another category, which had a significant linear correlation between the density of decoction and the rate of extract. The simulated linear equation was
动物药与矿物药都有悠久历史,是中药极具特色的重要组成部分[1,2,3,4],常常相提并论。3000多年前人类开始利用蜂蜜和蚕,2000多年前出现了珍珠、牡蛎养殖[5]。商周时期已有矿物药用的记载[6]。秦汉时期药物学专著《神农本草经》记载了动物药67种,矿物药46种;唐代《新修本草》收载动物药127种;明代《本草纲目》收载动物药461种,金石药161种[7,8]。至今,动物、矿物类中药饮片仍是医疗机构处方调配常用药,广泛应用于内、外、妇、儿、五官、皮肤等各科。中药汤剂是中医临床治疗疾病的最常用方式,具有个体化、调配灵活、显效快的优点。当前,尽管医院药师不断普及煎药知识,各级医疗机构也设置了煎药室提供中药代煎服务,但煎药质量标准难以量化,质量优劣难以客观判断[9],煎药质量评价仍然面临困难。利用水煎液密度与出膏率的相关性在线监测中药汤剂煎煮质量是一种新的思路,笔者在本实验中以矿物类、动物类中药饮片为研究对象,探讨中药饮片水煎液密度与出膏率之间的关系。
AU-120L型高精度密度测定仪(杭州金迈仪器有限公司);DHG-9146A型鼓风干燥箱(上海习仁科学仪器有限公司);ME204E型万分之一电子天平(瑞士梅特勒-托利多公司,感量:0.1 mg);ZNHW智能恒温电热套(天津工兴实验室仪器有限公司)。
动物类中药饮片15种,矿物类中药饮片10种,每种饮片3批,均购自安徽普仁中药饮片有限公司、亳州沪谯药业有限公司、安徽人民中药饮片有限公司,由湖北省中医院陈树和主任药师鉴定,均符合2015年版《中华人民共和国药典》标准,样品留存于湖北省中医院中药研究所,样品信息见
分别称取饮片50 g,置1 000 mL圆底烧瓶,加水浸泡30 min(一煎加7倍水,二煎加6倍水),电热套加热回流煎煮。一般饮片一煎30 min,二煎20 min;质地坚硬或滋补类饮片一煎60 min,二煎40 min。根据饮片性质实行特殊煎法:包煎及先煎。煎液用80目筛网[筛孔内径(180±7.6) μm]过滤,滤液转移至量筒中量取体积,分别计算一煎和二煎吸水率。
分别称取饮片50 g,通过吸水率精确计算加水量,使得到一煎和二煎煎煮液体积之和为500 mL,转移至500 mL量瓶,置恒温热水浴保温,液体密度测定仪测定80 ℃时煎液的密度(阿基米德原理)。精密吸取80 ℃煎液25 mL,置于已干燥至恒重的蒸发皿中,水浴蒸干,105 ℃干燥3 h,置干燥器中冷却30 min,迅速精密称定重量,计算饮片出膏率。出膏率(%)=(
对测得的25种动物类、矿物类饮片共75批样品的水煎液密度和饮片出膏率数据在直角坐标系中作散点图,使之可视化,从直观上观察图中散点分布趋势,见
K-均值聚类算法是聚类分析中基于划分的经典算法,具有良好简捷性和较强适应性,可以对多种数据类型进行聚类分析[11]。笔者应用SPSS Statistics 17.0版统计软件,按照水煎液密度、出膏率两个变量,对75个个案进行K-均值聚类分析。
将聚类数设置为2,用方差分析对聚类结果进行检验,见
将聚类数设置为3,用方差分析检验聚类结果,见
K-均值聚类的类别数是一个输入参数,要根据具体业务经验判断。不论设置为2类还是3类,全部矿物类饮片与贝壳动物类饮片都集中聚到一类。有的非贝壳动物类饮片品种由于批次不同导致差异,在聚类结果中数据点跨了类,而实际分类处理中不宜使一种饮片的不同批次样品跨类,故参考聚类分析结果并结合实际情况,给出矿物类、动物类饮片实际分类研究建议:将矿物类饮片和贝壳动物类饮片作为一个类别,将非贝壳动物类饮片,即动物全体、含动物胶的骨质鳞甲、粪便、附属物等作为另一个类别,分别研究其水煎液密度与出膏率关系。
2.5.1 矿物类与贝壳动物类饮片的水煎液密度与出膏率的关系 将分类所得第一类别,即10种矿物类与7种贝壳动物类饮片共51例个案的水煎液密度与出膏率作相关分析,提取数据制表[12],见
表4 第一类别中药饮片水煎液两个变量的描述性及相关性分析
Tab.4 Descriptive analysis and relevance analysis on two variables of first decoction pieces category
2.5.2 非贝壳动物类饮片的水煎液密度与出膏率关系 对于第二类别,即除了贝壳之外的8种动物类饮片共24例个案作相关分析,提取数据制表,如
表5 第二类别中药饮片水煎液两个变量的描述性及相关性分析
Tab.5 Descriptive analysis and relevance analysis on two variables of second decoction pieces category
图2 非贝壳动物类饮片回归曲线与个体水煎液密度值预测
Fig.2 Regression curve of animal decoction pieces other than shellfish and regression forecast of single decoction density value
2.5.3 非贝壳动物类饮片水煎液密度与出膏率的预测与验证 另取其他种类非贝壳动物类饮片共9批进行煎煮实验,对模拟回归方程的预测能力进行验证。给定
笔者在本实验探讨动物类、矿物类中药饮片水煎液密度与出膏率之间的相关性,采用基于聚类分析基础上的回归分析[13],有效处理了分布较复杂的数据点,使回归更接近于数据点走向趋势,提高后期预测的准确性。从化学成分和作用上看,贝壳动物类饮片的主要化学成分是钙盐和微量元素[14],矿物类饮片的起效成分也是微量元素。矿物类饮片中的化石药也是补充人体钙质的不足[6]。从溶解性看,贝壳动物类饮片与矿物类饮片都微溶或不溶于热水,出膏率均低,具有相似性。经K-均值聚类分析,聚为一类具有合理性。其水煎液密度与出膏率不具相关关系,是因为溶解度小,出膏率值很低,接近于0,有的煎液呈混悬状或有沉淀,从而增加了测量水煎液密度与出膏率时吸取液体的取样误差。
蝉蜕由于出膏率低且水煎液密度低,被K-均值聚类分析分配到第一类中,然而蝉蜕的性质与贝壳类、矿物类迥异,因此,笔者对数据进行分析时,将蝉蜕归为非贝壳动物类,作为非贝壳动物类线性方程最低起始点更为合适。
矿物类饮片与贝壳动物类饮片的水煎液密度与出膏率值低且不具线性相关性的研究结果提示,应采用其他方式评价矿物类饮片和贝壳动物类饮片的煎煮质量,其方法有待进一步研究。
非贝壳动物类中药饮片品种不多,目前所测的饮片品种和批次数据有限,回归方程仅初步模拟非贝壳动物类中药饮片水煎液密度与出膏率线性关系,与实际会有差距。后期拟增加样品量,增加批次,以完善回归方程,提高方程准确性。并且,结合本研究项目同期开展的植物类中药饮片煎煮的研究结果,最终建立复方煎煮预测模型。通过已测得的单味中药饮片的理论出膏率,推算复方的理论出膏率,再通过数学模型预测复方煎煮液的密度作为质量控制的指标,将实测水煎液密度与之比较,从而评判煎煮质量。